Новый подход к оценке иммуномодулирующей и вирус-ингибирующей активности медицинских препаратов

Резюме

Действие интерферона (ИФН) на клетки осуществляется посредством взаимодействия со специфическими клеточными рецепторами. ИФН необходим для формирования иммунного ответа на антигенный стимул, а каждый антиген является интерфероногеном. Наличие моноклональных антирецепторных антител позволяет определять непосредственно на клеточных мембранах иммунокомпетентных клеток человека экспрессию рецепторных белков гликопротеиновой природы, связывающихся с ИФНα, γ.

Цель работы - оценка in vitrо иммуномодулирующей и вирус-ингибирующей активности препаратов дибенорм, ингарон и тамерит по экспрессии интерфероновых рецепторов (ИФН-Р) α и γ на мононуклеарных клетках периферической крови донора.

Материал и методы. В работе использовали мононуклеарные клетки периферической крови (МКПК) донора, иммуномодуляторы, конъюгат на основе моноклональных антиидиотипических антител [м(анти-ИД)Ат] с интерфероноподобными свойствами, меченные флюоресцеинизотиоцианатом. В качестве модельного вируса при оценке антивирусной активности препаратов использовали смесь 3 вариантов реовируса. Препараты-иммуномодуляторы оценивали по уровню экспрессии ИФН-Р α и γ в экспериментах in vitro в прямом иммунофлюоресцирующем анализе.

Статистическую обработку проводили с помощью t-критерия Стьюдента при уровне достоверности p≤0,01 и с помощью компьютерной программы Microsoft Office Eхcel.

Результаты и обсуждение. Исследовали 2 препарата: дибенорм, ингарон - иммуномодуляторы с антивирусной активностью и препарат тамерит - иммуномодулятор. Эксперименты, проведенные in vitro, показали, что дибенорм и ингарон вызывали разный уровень экспрессии ИФН-Р α и γ. При предварительном внесении вирус-содержащей жидкости и иммуномодуляторов происходило резкое снижение уровня экспрессии ИФН-Р α и γ на мембранах лимфоцитов человека, что доказывает наличие вирус-ингибирующей активности у препаратов дибенорм и ингарон.

Препарат тамерит вызывал высокий уровень экспрессии ИФН-Р α и γ на мембранах лимфоцитов. При предварительном взаимодействии препарата тамерит с реовирусом с последующей индукцией этой смесью лимфоцитов человека отмечено усиление экспрессии ИФН-Р α и γ. В связи с этим можно считать, что тамерит является исключительно иммуномодулятором.

Заключение. Полученные в эксперименте данные, по всей видимости, позволят клиницистам решать вопрос о целесообразности назначения того или иного иммуномодулятора при вирусных либо других инфекционных заболеваниях.

Ключевые слова:мононуклеарные клетки периферической крови человека; интерфероновые рецепторы α и γ; моноклональные антиидиотипические антитела; иммуномодуляторы; иммунофлюоресцентный метод

Финансирование. Авторы заявляют об отсутствии финансирования (включая гранты и иные источники финансирования) при подготовке статьи.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Вклад авторов. Концепция и дизайн исследования - Нагиева Ф.Г., Баркова Е.П.; сбор и обработка материала - Нагиева Ф.Г., Баркова Е.П., Ласкавый В.Н., Строева А.Д., Харченко О.С., Лисаков А.Н., Свитич О.А., Зверев В.В.; статистическая обработка - Нагиева Ф.Г., Баркова Е.П., Строева А.Д.; написание текста - Нагиева Ф.Г.; редактирование - Нагиева Ф.Г., Строева А.Д.

Для цитирования: Нагиева Ф.Г., Баркова Е.П., Строева А.Д., Ласкавый В.Н., Харченко О.С., Лисаков А.Н., Свитич О.А., Зверев В.В. Новый подход к оценке иммуномодулирующей и вирус-ингибирующей активности медицинских препаратов // Инфекционные болезни: новости, мнения, обучение. 2022. Т. 11, № 4. С. 82-90. DOI: https://doi.org/10.33029/2305-3496-2022-11-4-82-90

Создание стандартных реагентов нового поколения, какими являются моноклональные антиидиотипические антитела [м(анти-ИД)Ат], имитирующие биологические эффекты интерферонов (ИФН) α и γ человека, т.е. антирецепторные антитела для ИФН-α и γ человека, позволило визуализировать in vitro интерфероновые α и γ рецепторы (ИФН-Р) на мембранах мононуклеарных клеток периферической крови (МКПК) человека, индуцированных различными препаратами, вирусными и бактериальными агентами.

Теория идиотипической сети впервые была предложена N. Jerne в 1974 г. [1]. Он предположил, что вариабельные участки антител - идиотипы организованы в сеть комплементарных связанных структур на основе взаимного распознавания друг друга. Идиотип - это антигенные детерминанты на молекуле антитела, которые распознаются (анти-ИД)Ат. N. Jerne классифицировал (анти-ИД)Ат на 2 подкласса: Ат-2 α - классические (анти-ИД)Ат, способные связываться с антигенными детерминантами вариабельной области антител, и Ат-2 β - антитела, имитирующие исходный антиген. Их называют также "несущими внутренний образ антигена" [2].

Имеются многочисленные сообщения об использовании (анти-ИД)Ат в качестве зондов для рецепторов на мембранах МКПК, что помогает проводить углубленный анализ структурно-функциональных взаимоотношений рецепторов клеток с активными сайтами антигенов [3-7].

ИФН являются наиболее хорошо изученной группой белков из числа цитокинов, обладающих широким спектром действия. ИФН - интегральная часть иммунной системы, они обеспечивают координацию пролиферации, дифференцировки и активации эффекторных клеток иммунной системы. Известно, что эффект ИФН на клетки осуществляется посредством взаимодействия со специфическими клеточными рецепторами [8]. Также известно, что ИФН необходим для формирования иммунного ответа на антигенный стимул и что каждый антиген является интерфероногеном [9-12]. В связи с этим можно определять непосредственно на клеточных мембранах иммунокомпетентных клеток человека экспрессию рецепторных белков гликопротеиновой природы, связывающихся с ИФН-α и γ.

Стандартные реагенты нового поколения, какими являются м(анти-ИД)Ат, имитирующие биологические эффекты ИФН человека, позволяют создать тонкий инструмент для решения многих фундаментальных и прикладных задач по изучению действия ИФН и ИФН-Р.

В 1986 г. в НИИ вирусных препаратов РАМН получены мышиные м(анти-ИД)Ат , имитирующие биологические свойства ИФН-α и γ человека, и с помощью этих антител было показано на лимфоцитах 200 безвозмездных доноров отсутствие экспрессии ИФН-Р α и γ, в отличие от пациентов с разной патологией, что означает выявление на мембранах МКПК человека с помощью м(анти-ИД)Ат только функционально активированных рецепторов [13].

В лаборатории гибридных клеточных культур отдела вирусологии ФГБНУ "НИИВС им. И.И. Мечникова" созданы высокочувствительные и специфичные флюоресцирующие зонды на основе м(анти-ИД) Ат) и показаны возможности выявлять in vitro экспрессию ИФН-Р α и γ на МКПК при различных инфекциях и по показателям экспрессии ИФН-Р судить об эффективности лечения, исходе заболевания или хронизации инфекционного процесса [13-18].

Цель работы - оценка in vitrо иммуномодулирующей и вирус-ингибирующей активности препаратов дибенорм, ингарон и тамерит по экспрессии ИФН-Р α и γ на мононуклеарных клетках периферической крови донора.

Материал и методы

В работе использовали лимфоциты, полученные из венозной крови донора резус-положительной 0(I) группы крови.

Изучаемые иммуномодуляторы

· Дибенорм - действующее вещество: 0,1% раствор альдегида муравьиной кислоты в изотоническом растворе натрия хлорида (патент СССР № 971108, кл. С127/08, А61К 39/225, 1982). Производитель: УП "Диалек", Республика Беларусь.

· Ингарон - ИФН-γ человеческий рекомбинантный, доза 100 000 МЕ. Производитель: ООО "НПП “Фармаклон”", Россия.

· Тамерит -5-амино-2,3 дигидрофталазин-1,4-диона натриевая соль Forte. Производитель: ООО "АБИДАФАРМА", Россия.

Модельный вирус - ортореовирус (далее - реовирус), семейство Reoviridae, подсемейство Spinareovirinae, геном состоит из сегментированной двуцепочечной рибонуклеиновой кислоты (РНК). В лаборатории молекулярной вирусологии отдела вирусологии ФГБНУ "НИИВС им. И.И. Мечникова" изолированы реовирусы из фекальных экстрактов от 12 детей с подтвержденной ротавирусной инфекцией. Однако проведенный гель-электрофорез геномной РНК вируса выявил 10 генных сегментов, которые распределились по схеме 3 : 3 : 4, что соответствует электрофоретипу генома реовирусов. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) с праймерами к реовирусу млекопитающих подтвердил наличие в исследуемых образцах реовирусной РНК в высокой концентрации [19].

Для проведения исследования 3 образца реовирусов были любезно предоставлены кандидатом биологических наук, заведующим лаборатории молекулярной вирусологии отдела вирусологии ФГБНУ "НИИВС им. И.И. Мечникова" Е.Б. Файзулоевым.

Выделение лимфоцитов. Мононуклеарные клетки периферической крови (МКПК) выделяли из венозной гепаринизированной (20 ЕД/мл) крови человека резус-положительной 0(I) группы в градиенте фиколла при плотности 1,077 г/см3 ("ПанЭко", США) путем центрифугирования в течение 20 мин при 1500 об/мин. Клеточную фракцию трижды промывали холодным фосфатно-буферным раствором (ФБР), осадок клеток ресуспендировали в среде ДМЕМ/F12 с 2% эмбриональной сывороткой крови коров с таким расчетом, чтобы в 1 мл было не менее 106 клеток. Лимфоциты по 2,0 мл распределяли в лунки 12-луночных планшет.

За 2 ч до выделения лимфоцитов из венозной крови к 0,2 мл изучаемых иммуномодуляторов вносили равный объем вирус-содержащей жидкости (ВСЖ) реовируса (несколько вариантов реовирусов объединяли в равном объеме) и оставляли на контакт при +4 °С, периодически встряхивая смесь.

Постановка эксперимента. В лунки планшеты с лимфоцитами вносили раздельно по 0,1 мл иммуномодуляторов и по 0,1 мл смеси иммуномодуляторов с ВСЖ реовируса. Сразу после внесения препаратов брали нулевую пробу и далее в разные временны́е интервалы в часах (0; 3; 17; 23; 27). Для исследования из каждого образца извлекали по 3 пробы.

Приготовление препаратов для прямого иммунофлюоресцентного анализа: в определенные временные интервалы извлекали из лунок 12-луночной планшеты суспензию лимфоцитов в объеме 5 мкл и наносили равномерно на предметные стекла с "окнами", образцы клеток высушивали при комнатной температуре в течение ночи. Далее образцы фиксировали дважды фильтрованным 3% параформальдегидом с 0,2% бычьим сывороточным альбумином (БСА) в течение 30 мин при 37 °С. Фиксатор дважды промывали ФБР и проводили блокировку образцов 10% нормальной козлиной сывороткой в течение 1 ч. Затем на каждое окно с образцами наносили флюоресцеинизотиоцианат (ФИТЦ) конъюгаты: α и γ-м(анти-ИД)Ат, меченные ФИТЦ. Инкубация 1,5 ч при комнатной температуре в темноте. ФИТЦ-конъюгаты перед исследованием разводили в 0,1% растворе сапонина на растворе Хэнкса с 0,01М HEPES-буфером. Экспрессию ИФН-Р α и γ на МКПК оценивали по процентному соотношению светящихся лимфоцитов на 500 анализируемых клетках. Прямой иммунофлюоресцентный анализ проводили общепринятым методом под люминесцентным микроскопом Optica (Италия).

Статистическую обработку проводили с использованием t-критерия Стьюдента при уровне достоверности p≤0,01 и с помощью компьютерной программы Microsoft Office Eхcel.

Результаты и обсуждение

В качестве референсного препарата для оценки эффективности иммуномодулирующей и вирус-ингибирующей активности был испытан иммуномодулятор дибенорм. В инструкции по применению данного лекарственного средства указано, что препарат относится к новому классу иммуномодулирующих препаратов, способствующих активации антиген-специфического иммунного ответа, при развитии которого достигается элиминация инфекционного агента; препарат подавляет репликацию вируса.

На рис. 1 представлены средние значения уровней экспрессии ИФН-Р α и γ. На лимфоцитах, индуцированных in vitro препаратом дибенорм, экспрессия ИФН-Р α и γ начиналась с 3 ч с момента индукции и достигала максимума к 23 ч, затем уровень экспрессии ИФН-Р α и γ начинал постепенно снижаться. Необходимо отметить, что уровень экспрессии ИФН-Р α на всех временных отрезках был выше в сравнении с уровнем экспрессии ИФН-Р γ (см. рис. 1А). Разница статистически достоверна при уровне значимости р<0,01. Иная картина экспрессии наблюдалась на мембранах лимфоцитов, индуцированных смесью препарата дибенорм и реовируса. Начиная с 3 ч с момента индукции под действием дибенорма на 50% резко снижался уровень экспрессии ИФН-Р α, и еще более резко - более чем на 80% - падал уровень экспрессии ИФН-Р γ. Наиболее высокая 100% ингибиция вирусной активности под действием дибенорма отмечена к 17 ч культивирования лимфоцитов, и этот эффект не прекращался на протяжении всего периода наблюдения. На рис. 1Б показано отсутствие роста ИФН-Р α и γ на мембранах МКПК при индукции смесью препарата дибенорм с реовирусом; на рис. 1Б представлены проценты ингибиции экпрессии ИФН-Р α и γ при индукции этой смесью.

Таким образом, на основе изучения in vitro на мембранах МКПК донора, индуцированного препаратом дибенорм с использованием в качестве маркеров м(анти-ИД)Ат с "внутренним образом" ИФН-α и γ в прямом иммунофлюоресцентном анализе можно утверждать, что данный препарат обладает как эффективным иммуномодулирующим свойством, так и высокой вирус-ингибирующей активностью при взаимодействии с реовирусом.

Аналогичными свойствами обладал иммуномодулятор ингарон (ООО "НПП “Фармаклон”", Россия). Действующее вещество ингарона - ИФН-γ человеческий рекомбинантный. Известно, что препарат обладает противовирусной активностью, что проверено на фибробластах человека, инфицированных вирусом везикулярного стоматита [20]. ИФН-γ блокирует репликацию вирусных ДНК и РНК, синтез вирусных белков и сборку зрелых вирусных частиц.

На рис. 2 представлены результаты исследования препарата ингарон в те же временные интервалы, что и препарата дибенорм. Анализ средних значений уровней экспрессии ИФН-Р α и γ показал, что ингарон являлся также эффективным иммуномодулятором (см. рис. 2А, Б), но уровень экспрессии ИФН-Р α и γ был ниже в сравнении с препаратом дибенорм. Разница статистически достоверна при уровне значимости р<0,01. Максимальная иммуномодулирующая активность по данным уровня экспрессии ИФН-Р α и γ наблюдалась к 17 ч с начала индукции МКПК донора препаратом ингарон и продолжалась на протяжении всего периода исследования. Следует отметить, что, как и у дибенорма, уровень экспрессии ИФН-Р α был выше в сравнении с ИФН-Р γ. К 17 ч этот показатель был выше на 51%. Вирус-ингибирующая активность ингарона на мембранах МКПК донора отмечена с 3 ч индукции смесью препарата с реовирусом. При этом ингибиция экспрессии ИФН-Р α и γ наблюдается при всех временных интервалах, но показатели уровня экспрессии, вызванные препаратом ингарон на МКПК донора, ниже в сравнении с препаратом дибенорм (см. рис. 2В, Г).

Иммуномодулятор тамерит, по результатам проведенных исследований, оказывал только иммуномодулирующий эффект (рис. 3).

На рис. 3 суммированы средние значения уровней экспрессии ИФН-Р α и γ на мембранах МКПК донора под действием иммунодулятора тамерит и комбинированного действия тамерита с реовирусом. Тамерит индуцировал на МКПК донора ИФН-Р α и γ, причем уровень экспрессии ИФН-Р α на всех временных интервалах был выше в сравнении с уровнем экспрессии ИФН-Р γ (см. рис. 3А). Комбинированное действие тамерита с реовирусом на МКПК вызывало высокий уровень ИФН-Р γ по сравнению с уровнем ИФН-Р α, т.е. данный препарат in vitro на МКПК донора вызывал "цитокиновый шторм" (см. рис. 3Б). На рис. 3В представлены показатели усиления в процентах экспрессии ИФН-Р α и γ на мембранах МКПК донора при индукции смесью препарата тамерит и реовируса. На рис. 3Г показано полное отсутствие ингибиции реовируса при индукции МКПК донора смесью препарата с реовирусом.

Экспрессия ИФН-Р на МКПК под воздействием медицинских препаратов является одним из главных факторов, влияющих на положительный результат цитокинотерапии при вирусных инфекциях и других соматических заболеваниях, где в качестве терапевтического воздействия используют препараты на основе цитокинов, в частности интерферонов и других иммуномодуляторов.

Полученные в ходе проведенного исследования данные о функциональной активности ИФН-Р расширят представления как о системе ИФН, так и о тесно связанной с ней иммунной системе.

Используя метод оценки функциональной активности ИФН-Р на МКПК доноров, индуцированных различными иммуномодуляторами, можно детально установить их эффективность в качестве иммуномодуляторов, а также обнаружить или исключить вирус-ингибирующую активность.

В данной работе была поставлена цель сравнить in vitro иммуномодуляторы по уровню индукции на МКПК человека экспрессии ИФН-Р α и γ. Известно, что ИФН является индуктором неспецифического иммунитета, который формируется гораздо раньше, чем антитела к возбудителю. Важным условием формирования противовирусной резистентности является наличие на поверхности клеток функционально активного рецепторного аппарата, т.е. для полного функционирования интерфероновой системы необходима экспрессия достаточного количества рецепторов для ИФН [21].

Существуют маркеры для непосредственного определения уровня экспрессии ИФН-Р на МКПК человека, а именно м(анти-ИД)Ат, имитирующие функции ИФН-α и γ. С помощью этих маркеров появилась возможность выяснить, обладал тот или иной иммуномодулятор вирус-ингибирующей активностью.

В качестве иммуномодуляторов с известной антивирусной активностью в экспериментах были использованы 2 препарата: дибенорм и ингарон. Дибенорм - это естественный иммуномодулятор, предназначенный в качестве антивирусного средства при лечении инфекционных заболеваний сельскохозяйственных и плотоядных животных (как правило, при трансмиссивном гастроэнтерите свиней, вызванном коронавирусом).

Ингарон - это рекомбинантный ИФН-γ человека. Он блокирует репликацию вирусных ДНК и РНК, синтез вирусных белков и сборку зрелых вирусных частиц и используется для профилактики и лечения гриппа.

Результаты, представленные на рис. 1 и 2, показали, что иммуномодуляторы дибенорм и ингарон обладали эффективным иммуномодулирующим свойством, индуцируя in vitro на МКПК донора экспрессию ИФН-Р α и γ. В то же время полученные результаты показали, что указанные иммуномодуляторы оказывали высокий вирус-ингибирующий эффект.

На рис. 3 представлены результаты оценки иммуномодулирующей и вирус-ингибирующей активности препарата тамерит. Анализ уровня экспрессии ИФН-Р α и γ на мембранах МКПК донора смесью иммуномодуляторов и реовируса показал рост ИФН-Р α и γ. Установлено, что тамерит индуцировал высокий уровень ИФН-Р γ. Ранее было установлено, что у ВИЧ-инфицированных пациентов в начальной стадии заболевания на мононуклеарных клетках обнаруживали в основном ИФН-Р α, и только 2% мононуклеарных клеток экспрессировали ИФН-Р γ. У больных с менее тяжелой формой заболевания обнаруживали 33% мононуклеарных клеток с экспрессией ИФН-Р γ, а у больных с синдромом приобретенного иммунодефицита на IV стадии заболевания 100% мононуклеарных клеток экспрессировали ИФН-Р γ [7, 13].

Заключение

Использованный в экспериментальном исследовании метод оценки эффективности иммуномодулирующих и вирус-ингибирующих свойств иммуномодуляторов (дибенорм, ингарон и тамерит) по уровню экспрессии ИФН-Р α и γ на мембранах МКПК донора позволил установить, какими конкретно, иммуномодулирующими и/или вирус-ингибирующими, свойствами обладали изученные препараты. Полученные в эксперименте данные, по всей видимости, позволят клиницистам решать вопрос о целесообразности назначения того или иного иммуномодулятора при вирусных либо других инфекционных заболеваниях.

Благодарность. Исследование выполнено при научной и методической поддержке Центра коллективного пользования "НИИВС им. И.И. Мечникова" - проект Минобрнауки России, соглашение № 075-15-2021-676 от 28.07.2021.

ЛИТЕРАТУРА

1.Jerne N.K. Towards a network theory of the immune system // Ann. Immunol. (Paris). 1974. Vol. 125, N 1-2. P. 373-389.

2.Richter P.H. A network theory of the immune system // Eur. J. Immunol. 1975. Vol. 5, N 5. P. 350-354. DOI: https://doi.org/10.1002/eji.1830050511

3.Dianzani F., Scheglovitova O., Gentile M., Scanio V., Barrest C., Ficociello B. et al. Interferon gamma stimulates cell-mediated transmission of HIV type 1 from abortively infected endothelial cells // AIDS Res. Hum. Retroviruses. 1996. Vol. 12, N 7. P. 621-627. DOI: https://doi.org/10.1089/aid.1996.12.621

4.Kauffman R.S., Noseworthy J.H., Nepom J.T., Finberg R., Fields B.N., Greene M.I. Cell receptors for the mammalian reovirus.II. Monoclonal anti-idiotypic antibody blocks viral binding to cells // J. Immunol. 1975. Vol. 131, N 5. P. 2539-2541.

5. Mizukoshi E., Kaneco S., Yanagi M., Ohno H., Kaji K., Terasaki S. et al. Expression of interferon alpha/beta receptor in the liver of chronic hepatitis C patients // J. Med. Virol. 1998. Vol. 56. P. 217-223. DOI: https://doi.org/10.1002/(sici)1096-9071(199811)56:3<217::aid-jmv7>3.0.co;2-a

6.Morita K., Tanaka K., Saito S., Kitamura T., Kiba T., Fujii T. et al. Expression of interferon receptor genes in the liver as a predictor of interferon response in patients with chronic hepatitis C // J. Med. Virol. 1999. Vol. 58, N 4. P. 359-365. DOI: https://doi.org/10.1002/(sici)1096-9071(199908)58:4<359:aid-jmv7>3.0.co;2-s

7.Thanavala Y.M., Roitt I.M. Monoclonal anti-idiotypic antibodies as surrogates for hepatitis B surface antigen // Int. Rev. Immunol. 1986. Vol. 1, N 1. P. 27-39. DOI: https://doi.org/10.3109/08830188609056599

8. Фрейдлин И.С., Кузнецова С.А. Иммунные комплексы и цитокины // Медицинская иммунология. 1999. Т. 1, № 1-2. С. 27-36.

9. Ершов Ф.И. Система интерферона в норме и при патологии. Москва : Медицина, 1996.

10. Ершов Ф.И., Наровлянский А.Н., Мезенцева М.В. Ранние цитокиновые реакции при вирусных инфекциях // Цитокины и воспаление. 2004. Т. 3, № 1. С. 3-6. DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0507-4088-2018-63-1-10-18

11. Соловьев В.Д., Бектемиров Т.А. Интерфероны в теории и практике медицины. Москва, 1981.

12. Srurkovich S.V., Eremkina E.I. The probable role of interferon in allergy // Ann. Allergy. 1975. Vol. 35, N 6. P. 377-383.

13. Баркова Е.П., Нагиева Ф.Г., Кузнецов В.П., Беляев Д.Л., Никулина В.Г., Бабаянц А.А. и др. Экспрессия рецепторов для человеческих интерферонов альфа и гамма на поверхности мононуклеарных клеток периферической крови при некоторых вирусных инфекциях // Вопросы вирусологии. 1999. Т. 44, № 1. С. 16-18.

14. Баркова Е.П., Нагиева Ф.Г., Анджапаридзе О.Г. Антипролиферативная активность моноклональных антиидиотипических антител, имитирующих биологические эффекты человеческих интерферонов альфа // Вопросы вирусологии. 1992. Т. 37, № 1. С. 64-67.

15. Баркова Е.П., Вдовина Е.Т., Нагиева Ф.Г., Ющук Н.В., Знойко О.О. Никулина В.Г. и др. Функциональная активность интерфероновых рецепторов мононуклеаров периферической крови пациентов с вирусными гепатитами // Биопрепараты. 2001. № 4. С. 18-21.

16. Нагиева Ф.Г., Баркова Е.П., Никулина В.Г., Анджапаридзе О.Г. Моноклональные антитела, имитирующие биологические эффекты человеческих интерферонов альфа // Вопросы вирусологии. 1991. Т. 36, № 5. С. 402-407.

17. Нагиева Ф.Г., Баркова Е.П., Никулина В.Г., Краснова Н.И., Анджапаридзе О.Г. Протективный эффект моноклональных антиидиотипических антител при экспериментальной герпетической инфекции // Вопросы вирусологии. 1995. Т. 40, № 2. С. 70-72.

18. Лисаков А.Н., Нагиева Ф.Г., Баркова Е.П., Гайдерова Л.А., Федотов А.Ю., Никулина В.Г. Исследование in vitro интерфероновых рецепторов иммунокомпетентных клеток при экспериментальных гриппозных инфекциях // Инфекция и иммунитет. 2015. Т. 5, № 3. С. 273-278. DOI: https://doi.org/10.15789/2220-7619-2015-3-273-278

19. Файзулоев. Е.Б., Корчевая Е.П., Марков Д.В., Петруша О.А., Зверев В.В. Проблема контаминации культур клеток ортореовирусами млекопитающих // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2018. № 5. С. 104-107.

20. Рахматулина М.Р., Большенко Н.В. Опыт применения интерферона-гамма в терапии вирусных инфекций, передаваемых половым путем // Акушерство и гинекология. 2018. Т. 12. С. 102-108. DOI: https://doi.org/10.18565/aig.2018.12.149-156

21. Dreesman G.R., Kennedy R.C. Anti-idiotypic antibodies: implications of internal image based vaccines for infectious diseases // J. Infect. Dis. 1985. Vol. 151, N 5. P. 761-765. DOI: https://doi.org/10.1093/infdis/151.5.761

ГЛАВНЫЙ РЕДАКТОР
ГЛАВНЫЙ РЕДАКТОР
Ющук Николай Дмитриевич
Академик РАН, профессор, почетный заведующий кафедрой инфекционных болезней и эпидемиологии, президент ФГБОУ ВО "Московский государст­венный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова" Минздрава России, член Правления Национального научного общества инфекционистов.
Вскрытие
Медицина сегодня
IX Междисциплинарная международная конференция: "Актуальные вопросы микрохирургии". Памяти Н.О. Миланова.

Приветствуем вас в новом 2023 году, который мы встретили с надеждой и неизменно с планами на будущее! Традиционно в феврале ученики Николая Олеговича Миланова, сотрудники основанной им кафедры в Сеченовском Университете, планируют проведение уже девятой мемориальной...

Тромботические проблемы при цереброваскулярной патологии и коморбидных процессах

Уважаемые коллеги! 10.02.2023 состоится Совместный научно-образовательный симпозиум Национальной Ассоциации по тромбозу и гемостазу и ФГБНУ "Научный центр неврологии" "Тромботические проблемы при цереброваскулярной патологии и коморбидных процессах". Начало регистрации в...

Приглашаем специалистов Сибирского федерального округа 9-10 февраля посетить Школу РОАГ!

Приглашаем специалистов Сибирского федерального округа 9-10 февраля посетить Школу РОАГ! Успешно продолжается образовательная работа общероссийского проекта "Школы РОАГ". Очередная встреча пройдет 9-10 февраля в онлайн-формате и объединит врачей Иркутска, Кемерово, а также...


Журналы «ГЭОТАР-Медиа»