Оценка четырех коммерческих тест-систем для диагностики первичной инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр
Ключевые слова: вирус Эпштейна-Барр, иммуноглобулин класса M, иммуноглобулин класса G, иммунофлюоресцентный метод, иммуноферментный анализ, хемилюминесцентный анализ, иммунофильтрация, вирусный капсульный антиген
Источник: De Ory F., Guisasola M.E., Sanz J.C. et al. // Clin. Vaccine Immunol. - 2011. - Vol. 18, N 3. - P. 444-448.
PMID: 21191077
Авторы из Испании в журнале "Clinical and Vaccine Immunology" опубликовали результаты сравнения 4 диагностических коммерческих систем для серологического определения вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ). 125 образцов крови больных с клиническими проявлениями инфекционного мононуклеоза тестировали на антитела иммуноглобулинов класса М (IgM) и G (IgG) к вирусному капсульному антигену (VCA) и ядерному антигену (EBNA) ВЭБ.
Непрямая иммунофлюоресценция (НИФ) для определения VCA IgM и IgG антител и антикомплементный иммунофлюоресцентный метод для определения антител EBNA (Meridian Bioscience Inc.) были использованы в качестве эталонных методов. С помощью данных методов все случаи диагностированной ВЭБ-инфекции были разделены на первичную (наличие IgM для VCA или IgG для VCA при отсутствии антител EBNA; n=82), перенесенную ВЭБ-инфекцию (наличие IgG к VCA и EBNA антител при отсутствии IgM к VCA; n=26) или отсутствие инфекции (отрицательные результаты по всем трем маркерам; n=17). Были протестированы следующие диагностические системы: 2 метода хемилюминисцентного иммунологического анализа [CLIAs; Liason (CLIA-L; DiaSorin) и Immulite 2000 (CLIA-I; Siemens)], метод иммунофильтрации (IF; All.Diag) и твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA; DiaSorin). В пробах IgM чувствительность изменялась в пределах от 67,1% (ELISA) до 92,2% (CLIA-L), а специфичность распределилась от 93,8% (CLIA-L) до 100% (IF). В пробах VCA IgG чувствительность изменялась от 79,4% (IF) до 94,4% (CLIA-I), а специфичность варьировалась от 94,4% (IF и CLIA-L) до 100% (CLIA-I и ELISA). В пробах EBNA чувствительность распределилась от 78,1% (IF) до 93,8% (CLIA-I), специфичность изменялась в пределах от 32,3% (CLIA-L) до 91,4% (IF). В отношении ВЭБ-профиля соответствующие показатели чувствительности (для исключения свежей первичной инфекции) для IF, CLIA-L, CLIA-I и ELISA были 92,7; 93,8; 89,0 и 89,6% соответственно, и те же для специфичности (исключая свежие случаи первичной инфекции) составили 90,7; 94,6; 97,7 и 95,2% соответственно. Несмотря на то что существовало ограничение в некоторых индивидуальных маркерах, особенно у CLIA-L для IgG EBNA, диагностические системы оценены как полезные для диагностики ВЭБ-инфекции.
Многофункциональность человеческих Т-клеток памяти CD8+, вызванная острыми или хроническими вирусными инфекциями, не зависит от возраста
Ключевые слова: тимус, Т-клетки, лихорадка Западного Нила, цитомегаловирус, гамма-интерферон, фактор некроза опухоли, интерлейкин-2
Источник: Lelic A., Verschoor C.P., Ventresca M. et al. // PLoS Pathog. - 2012. - Vol. 8, N 12. - e1003076.
PMID: 23271970
С возрастом у человека прогрессирует потеря функции тимуса и нарушается процесс переключения популяции циркулирующих CD8+ T-клеток от наивных до клеток памяти. Эти повреждения, предположительно, являются результатом нарушения способности CD8+ T-клеток у пожилых индивидуумов. В то же время доказательств того, что эти глобальные изменения - эффект вирус-специфичного CD8+ T-клеточного иммунитета у пожилых, недостаточно. Для дальнейшего понимания функциональных свойств вирус-специфичных CD8+ T-клеток у пожилых, авторы из Канады опубликовали в журнале "PLoS Pathogens" результаты обследования группы пациентов с острой инфекцией, вызванной вирусом лихорадки Западного Нила (ЛЗН) и хроническими инфекциями, вызванными вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ) и цитомегаловирусом (ЦМВ). Исследуемая группа была стратифицирована на группу молодых (моложе 40 лет), группу среднего возраста (41-59 лет) и группу старшего возраста (старше 60 лет). В группе старшего возраста CD8+ Т-клетки показали заметное уменьшение частоты выявления наивной субпопуляции и повышение частоты выявления CD8+ T-клеток с экспрессией CD57 и потерей CD28, как предварительно описывалось. В то же время авторы не наблюдали влияния возраста ни на частоту выявления вирус-специфичных CD8+ T-клеток в циркулирующем пуле, ни на функциональность (основывающейся на продукции интерферона-гамма, фактора некроза опухоли-α, интрелейкина-2, гранзима-B, перфорина и мобилизации CD107a). Авторами отмечено, что CD8+ T-клетки, специфичные для ЛЗН, ЦМВ или ВЭБ, показали особые функциональные профили, но данные изменения не были связаны с возрастом. В целом, представленные данные не подтверждают гипотезу, что старение иммунной системы приводит к поломке CD8+ T-клеточного иммунитета и подтверждает возможность создания CD8+ T-клеточных вакцин для предупреждения инфекций, вызванных новейшими вирусами у пожилых пациентов.
Прогностические факторы течения хронической активной инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр
Ключевые слова: вирус Эпштейна-Барр, тромбоцитопения, 5-летнее выживание, Т-клетки, тромбоциты, натуральные киллеры
Источник: Kimura H., Morishima T., Kanegane H. et al. // J. Infect. Dis. - 2003. - Vol. 187, N 4. - P. 527-533.
PMID: 12599068
Хроническая активная Эпштейна-Барр инфекция (ХАВЭБ) - заболевание, характеризующееся высокой заболеваемостью и смертностью. Для выявления прогностических факторов, ученые из Японии провели национальное исследование, результаты которого были опубликованы в журнале "The Journal of Infectious Diseases". В ходе исследования проанализированы данные 82 пациентов, удовлетворяющих критериям ХАВЭБ. Из 82 пациентов 47 выжили и 35 умерли. Мультивариантный анализ выявил, что тромбоцитопения и возраст дебюта заболевания коррелировали со смертностью. Вероятность 5-летнего выживания составила 0,45 у возрастных пациентов (возраст дебюта более или равен 8 годам), 0,94 - у более молодых пациентов (р<0,001); 0,38 - у пациентов с тромбоцитопенией (количество тромбоцитов менее 12Ч104 тромбоцитов/мкл при диагностике) и 0,76 - у пациентов без тромбоцитопении (р=0,01). Более того, пациенты с Т-клетками, инфицированными ВЭБ, имели более короткий период выживаемости, чем пациенты с инфицированными НК-клетками (вероятность 5-летней выживаемости 0,59 в сравнении с 0,87, р<0,009).
Авторы делают вывод, что пациенты с ХАВЭБ с поздним дебютом заболевания, тромбоцитопенией и инфицированием Т-клеток имели значительно менее благоприятный прогноз.
Мутированные RAS-транфицированные, ВЭБ-трансформированные лимфобластоидные клеточные линии как модель опухолевой вакцины для усиления T-клеточного ответа против рака поджелудочной железы: пилотное исследование
Ключевые слова: вирус Эпштейна-Барр, рак поджелудочной железы, лимфобластоидные клеточные линии, антигенпрезентирующие клетки, онковакцина, лимфома, аденокарцинома, цитотоксические лимфоциты, реакция гиперчувствительности замедленного типа
Источник: Kubuschok B., Pfreundschuh M., Breit R. et al. // Hum. Gene Ther. - 2012. - Vol. 23, N 12. - P. 1224-1236.
PMID: 22966960
Генетически модифицированные лимфобластоидные клеточные линии (ЛКЛ) являются привлекательным альтернативным ресурсом антигенпрезентирующих клеток для онковакцинации in vitro.
Авторы из Германии проверили справедливость данного положения в отношении пациентов с раком поджелудочной железы в фазе клинического исследования и опубликовали полученные результаты в журнале "Human Gene Therapy". В качестве модели опухолевого антигена выбрали точечную мутацию (кодон 12) Ki-Ras p21 онкогена (muRas), часто (~85%) представленную при аденокарциноме поджелудочной железы. Аутологичные ЛКЛ были культивированы in vitro с помощью спонтанного роста из периферических лимфоцитов крови от 7 пациентов с карциномой поджелудочной железы и генетически модифицированы с эписомным Эпштейна-Барр-вирусным (ВЭБ) экспрессионным вектором для экспрессии muRas (muRas-ЛКЛ). Проводилась еженедельная вакцинация с помощью подкожных инъекций 5Ч106 muRas-ЛКЛ. У 6 из 7 пациентов лечебная вакцинация способствовала Т-клеточному ответу с повышением частоты выявления muRas-специфического прекурсора цитотоксических Т-лимфоцитов в периферической крови и положительной реакции гиперчувствительности замедленного типа в месте инъекции. Кроме местной реакции и гриппоподобных симптомов, не выявлено проявлений токсичности и признаков острой ВЭБ-инфекции, дебюта ВЭБ-ассоциированной лимфомы или других тяжелых осложнений. Клиническая эффективность (стабилизация заболевания) наблюдалась в течение короткого периода (2-4 мес) у 4 из 7 пациентов (57%), в основном на ранних стадиях развития опухоли.
Результаты свидетельствуют, что ЛКЛ, презентующие генетически модифицированные антигены, являются ценным и легкодоступным сырьем для проведения аутологичной опухолевой вакцинации in vivo. ЛКЛ могут быть трансфектированы любым известным опухолевым антигеном и поэтому должны быть в дальнейшем клинически изучены.
Стимуляция функции человеческих специфических цитолитических эффекторов вируса Эпштейна-Барр и цитомегаловируса при помощи аллогенных HLA-молекул
Ключевые слова: вирус Эпштейна-Барр, цитомегаловирус, HLA-молекулы, Т-клетки, лимфобластоидные клеточные линии, мононуклеарные клетки, аллогенная клеточная стимуляция
Источник: D’Orsogna L.J., van den Heuvel H., van der Meer-Prins E.M. et al. // J. Immunol. - 2012. - Vol. 189, N 10. - P. 4825-4831.
PMID: 23077240
Вирусные инфекции являются основной причиной заболеваемости смертности, и существует немного терапевтических мероприятий, способных усилить вирус-специфический Т-клеточный ответ. Хотя алло-HLA перекрестная активность вирус-специфических Т-клеток памяти - часто встречающееся явление, пока неясно, может ли сенсибилизация специфических аллогенных клеток противоположно вызывать вирусно-пептидный/ауто-HLA ограниченный цитотоксический Т-клеточный ответ у человека.
Авторы из Нидерландов опубликовали в журнале "Human Gene Therapy" исследование, проведенное для того, чтобы определить, может ли стимуляция аллогенной HLA вызвать цитолитический иммунный ответ против вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ), авторы использовали ранее описанную алло-HLA-B*44:02 перекрестную активность ВЭБ пептида/HLA-B8 рестриктированных T-клеток. HLA-B8(+) HLA-B44(-) ВЭБ-серопозитивные мононуклеарные клетки периферической крови были стимулированы либо HLA-B*44:02(+), либо HLA-B*44:03(+) рассогласованно облученными мононуклеарными клетками периферической крови в реакции смешанной культуры лимфоцитов. Алло-HLA-стимулированные клетки-респондеры были позже оценены на цитотоксичность с использованием аутологичных целевых клеток, нагруженных ВЭБ-пептидом и ненагруженных HLA-B8(+) ВЭБ-целевых клеток лимфобластоидных клеточных линий. Мононуклеарные клетки периферической крови от ВЭБ-серопозитивных доноров приобретали ВЭБ-специфичную цитолитическую эффекторную функцию вслед за специфической алло-HLA стимуляцией. В заключение авторы выявляли цитолитический цитомегаловирус-специфический ответ, используя специфическую аллогенную клеточную стимуляцию, для подтверждения того, что эта методика может быть использована для вызывания вирусно-пептидного/ауто-HLA ограниченного ответа даже за счет внутренней реакции рецепторов Т-клеток. Аллогенная клеточная стимуляция, использующаяся как клеточная терапия, может служить потенциальным средством усиления антивирусного Т-клеточного ответа у пациентов с ВЭБ или цитомегаловирусной инфекцией.
Профилактика (ВАЛ-)ганцикловиром снижает риск развития первичной Эпштейна-Барр вирусной инфекции у пациентов педиатрического профиля с трансплантированной почкой
Ключевые слова: вирус Эпштейна-Барр, (вал-)ганцикловир, ганцикловир, трансплантация почек, донор, реципиент, иммуносупрессивная терапия
Источник: Hocker B., Bohm S., Fickenscher H. et al. // Transpl. Int. - 2012. - Vol. 25, N 7. - P. 723-731.
PMID: 22533698
Первичная инфекция, вызванная вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ), является серьезным фактором риска для реципиентов почечных трансплантатов педиатрического профиля, особенно в отношении развития ВЭБ-опосредованных посттрансплантационных лимфопролиферативных заболеваний (ПТЛЗ). В настоящее время не разработано профилактического режима.
Авторы из Германии изучили и опубликовали в журнале "Transplant International" взаимосвязь между химиопрофилактикой (вал-)ганцикловиром (ВГЦВ) или ганцикловиром (ГЦВ) и выявлением ВЭБ-виремии у детей - реципиентов почечных трансплантантов, не имевших прежде контактов с ВЭБ-инфекцией, получивших трансплантат от ВЭБ-позитивных доноров и вследствие этого имевшие высокий риск развития первичной ВЭБ-инфекции.
В проспективном мультицентровом исследовании (n=114) авторы сравнили группу пациентов с проводимой химиопрофилактикой (n=20) с группой без химиопрофилактики (n=8). В течение годового периода исследования антивирусная профилактика с использованием ВГЦВ/ГЦВ ассоциировалась со значительным снижением случаев первичной ВЭБинфекции: 9/20 пациентов (45%) в группе профилактики имели первичную ВЭБ-инфекцию в сравнении с 8/8 (100%) пациентов контрольной группы (р<0,0001). Профилактика ассоциировалась с заметно низкой вирусной нагрузкой ВЭБ (р<0,001). Тип или интенсивность иммуносупрессивной терапии не влияли на развитие первичной ВЭБ-инфекции илиуровень/персистирование ВЭБ-нагрузки. Химиопрофилактика с использованием ВГЦВ/ГЦВ ассоциировалась со снижением частоты виремии ВЭБ в течение первого года после трансплантации среди педиатрических реципиентов высокого риска, получивших почечный аллотрансплантат.
Генетическое повреждение A20 (TNFAIP3) при позитивной спид-ассоциированной лимфоме
Ключевые слова: СПИД-ассоциированная лимфома, вирус Эпштейна-Барр, ходжкинская лимфома, протеин А20
Источник: Giulino L., Mathew S., Ballon G. et al. // Blood. - 2011. - Vol. 117, N 18. - P. 4852-4854.
PMID: 21406721
А20 - отрицательный регулятор ядерного фактора каппа би (NF-κB) расценивается как ген - супрессор роста опухоли при различных типах В-клеточной лимфомы. СПИД-ассоциированные лимфомы (САЛ) являются высокодифференцированными В-клеточными лимфомами, часто ассоциированными с инфекцией вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ).
Авторы из США провели исследование с целью изучения панели САЛ на предмет выявления повреждений А20. Результаты исследования были опубликованы в журнале "Blood".
FISH-метод показал делецию А20 в 6 (18%) из 33 случаев. Мутации А20 были выявлены в 3 из 19 случаев (16%), включая 2 случая с делецией комплементарной аллели. Иммуногистохимическое исследование показало отсутствие протеина А20 в 7 из 55 проб (13%). В противоположность полученным результатам при ходжкинской лимфоме, при которой ВЭБ-инфекция и повреждения А20 являлись взаимоисключающими состояниями, инактивация А20 наблюдалась как в случае ВЭБ (+), так и в случае ВЭБ (-). ВЭБ-латентный мембранный протеин-1, который активирует NF-κB, не был выделен в 12 из 13 случаев потери А20.
Авторы делают вывод, что при САЛ потеря А20 может быть альтернативным механизмом активации NF-κB при отсутствии экспрессии латентного мембранного протеина-1.
Новый тетрамерный gp350(1-470) как потенциальная вакцина против вируса Эпштейна-Барр
Ключевые слова: инфекционный мононуклеоз, В-клеточная трансформация, вирус Эпштейна-Барр, вакцина, иммуноглобулин G, тетанус-анатоксин
Источник: Cui X., Cao Z., Sen G. et al. // Vaccine. - 2013. - Vol. 31, N 30. - P. 3039-3045.
PMID: 23665339
Инфекционный мононуклеоз и В-клеточная трансформация в ответ на инфицирование вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ) зависит от присоединения гликопротеина вирусной оболочки gp350 к CD21 В-клеток. Gp350 - специфическое антитело, которое обеспечивает большинство ВЭБ-нейтрализующей активности плазмы инфицированных пациентов, делая этот протеин обещающим целевым антигеном для профилактической ВЭБ-вакцины.
Авторы из США описали новую, базирующуюся на тетрамерном gp350 протеине вакцину, которая представляет заметное усиление иммуногенности по сравнению с мономерным аналогом. Результаты исследования были опубликованы в журнале "Vaccine".
Плазмидная ДНК была сконструирована для синтеза внутритрансфицированных овариальных клеток китайского хомячка из тетрамерного укороченного (а.а. 1-470) gp350 протеина [gp350(1-470)]. Тетрамерный gp350(1-470) индуцировал 20-кратное увеличение gp350(1-470), специфического иммуноглобулина класса G и более чем 19-кратное увеличение титра нейтрализующих антител в наиболее высоких дозах и проявлял более чем 25-кратную иммуногенность в расчете на вес, по сравнению с мономерным gp350(1-470). Также эпидермальная иммунизация плазмидной ДНК, кодирующей тетрамер gp350(1-470) вызывала 8-кратное повышение сывороточного специфического gp350(1-470) иммуноглобулина по сравнению с мономером. Фиксация тетрамера gp350(1-470) на человеческих CD21 была более чем в 24 раза эффективнее в расчете на вес, чем для мономера, но ни тетрамер, ни мономер не способствовали активации поликлональных человеческих В-клеток. Введение активных универсальных эпитопов тетанус-анатоксин специфичных CD4+ Т-лимфоцитов в тетрамер gp350(1-470) не влияло на ответ специфического gp350(1-470) иммуноглобулина класса G у не контактировавших ранее с антигеном мышей и приводило к супрессии ответа специфического gp350(1-470) иммуноглобулина класса G у мышей, контактировавших с тетанус-анатоксином.
Авторы делают вывод, что тетрамерный gp350(1-470) - потенциально перспективный кандидат на апробирование в качестве профилактической ВЭБ вакцины, и мультимеризация этого протеина описанным методом, вероятно, будет клинически значимой для улучшения иммуногенности других белков, вызывающих интерес в отношении вакцин.
Плазменный профиль вирусной микроРНК выявляет потенциальные биомаркеры хронической инфекции, вызванной вирусом Эпштейна-Барр
Ключевые слова: вирус Эпштейна-Барр, биомаркер, хроническая активная вирусная инфекция, микроРНК
Источник: Kawano Y., Iwata S., Kawada J.I. et al. // J. Infect. Dis. - 2013. - Vol. 208, N 5. - P. 771-779.
PMID: 23687223
Хроническая активная инфекция, вызванная вирусом Эпштейна-Барр (ХИВЭБ), характеризуется высокой заболеваемостью и смертностью, поэтому необходимы биомаркеры для определения тяжести и прогноза заболевания. МикроРНК (миРНК) - маленькие некодирующие РНК, вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) кодирует многочисленные миРНК.
Авторы провели исследование с целью изучения профиля циркулирующих в крови миРНК, ассоциированных с ВЭБ, в качестве новых биомаркеров ХИВЭБ. Результаты исследования были опубликованы в журнале "The Canadian Journal of Infectious Diseases".
Экспрессию миРНК в плазме оценивали с помощью 12 миРНК в 2 открытых считываемых рамках (BART и BHRF). Уровень экспрессии изучали у 19 пациентов с ХИВЭБ, 14 больных мононуклеозом и 11 здоровых (группа контроля). Относительный уровень экспрессии миРНК в плазме был определен с помощью пробы TaqMan на основе количественного метода.
Плазменные уровни миR-BART1-5p, 2-5p, 5 и 22 были значимо выше у пациентов с ХИВЭБ, нежели таковые показатели у пациентов с инфекционным мононуклеозом и в группе контроля. Плазменные уровни миR-BART1-5p, 2-5p, 5 и 22 был значительно повышен у пациентов с ХИВЭБ с системными симптомами по сравнению с пациентами без системных симптомов. Уровни миR-BART2-5p, 13 и 15 показали предельные клинические значения, ассоциированные со специфическими клиническими состояниями, в противоположность содержанию ВЭБ в плазме. Уровни специфических миРНК в плазме дифференцированно повышались у пациентов с ХИВЭБ.
Авторы делают вывод, что различные миРНК, особенно миR-BART2-5p, 13 и 15 являются потенциальными биомаркерами тяжести и прогноза заболевания.
Роль нуклеосомных белков сборки TAF-Iв и NAP1 в активации экспрессии BZLF1 и реактивации вируса Эпштейна-Барр
Ключевые слова: вирус Эпштейна-Барр, латентная инфекция, литическая инфекция, ген BZLF1, вирусный геном
Источник: Mansouri S., Wang S., Frappier L. // PLoS One. - 2013. - Vol. 8, N 5. - e63802.
PMID: 23691099
Реактивация вируса Эпштейна-Барр (ВЭБ) от латентной до литической инфекции начинается с экспрессии вирусного гена BZLF1, запускающего последующий каскад экспрессии вирусных генов и амплификацию вирусного генома.
Используя РНК интерференцию, авторы из Канады показали, что нуклеосомные белки сборки NAP1 и TAF-I положительно воздействуют на реактивацию ВЭБ в эпителиальных клетках через индукцию экспрессии BZLF1. Кроме того, сверхэкспрессии NAP1 или β-изоформы TAF-I (TAF-Iβ) в AGS клетках латентно инфицированных ВЭБ было достаточно для запуска экспрессии BZLF1. Результаты исследования были опубликованы в "Public Library of Science One".
Эксперименты с имунопреципитацией хроматина, проведенные на клетках AGS, инфицированных ВЭБ, показали, что TAF-I ассоциируется с промотором BZLF1 через индукцию лизиса и действует на локальную модификацию гистона путем повышения диметилирования H3K4 и ацетилирования H4K8. Была обнаружена ассоциация между MLL1, диметилирующего H3K4, с промотором BZLF1 через литическую индукцию по TAF-I-зависимому пути, и истощения MLL1, снижающего экспрессию BZLF1, подтверждая их воздействие на реактивацию лизиса.
Авторы делают вывод, что TAF-Iβ способствует BZLF1 экспрессии и последующей литической инфекции через влияние на промотор хроматина BZLF1.
Глюкокортикоиды активируют литическую репликацию вируса Эпштейна-Барр через положительную регуляцию экспрессии немедленно-раннего гена BZLF1
Ключевые слова: вирус Эпштейна-Барр, глюкокортикоиды, литическая репликация, ген BZLF1, герпесвирусная инфекция, лимфома Беркитта
Источник: Yang E.V., Webster Marketon J.I., Chen M. et al. // Brain, Behav. Immun. - 2010. - Vol. 24, N 7. - P. 1089-1096.
PMID: 20466055
Иммунная дисрегуляция, вызванная психологическим стрессом, показана как причина прерывания остановившейся экспрессии и реактивации латентной герпесвирусной инфекции. Один из таких вирусов - вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ), который ассоциируется с развитием различных онкологических процессов у человека. ВЭБ инфицировал более 90% жителей Северной Америки и персистирует в течение жизни в виде латентной внутриклеточной инфекции. Хотя некоторые исследования показали, что глюкокортикоиды (ГК) могут напрямую вызывать реактивацию латентных вирусов, механизм вовлечения стрессовых гормонов в контроль экспрессии генов ВЭБ не до конца понятен.
Авторы из США проверили гипотезу, что ГК могут индуцировать латентный геном ВЭБ на литическую репликацию через индукцию немедленно-раннего гена BZLF1, который кодирует литический трансактиваторный белок ZEBRA. Результаты исследования были опубликованы в журнале "Brain, Behavior, and Immunity".
В данном исследовании авторы показали дозозависимую положительную регуляцию экспрессии BZLF1 мРНК гидрокортизоном и дексаметазоном в клетках Дауди с позитивным геномом ВЭБ в линии клеток лимфомы Беркитта и дексаметазон-индуцированную продукцию раннего гена BLLF3 (кодирующего ВЭБ уридинфосфатазу) и BALF5 (кодирующего ДНК-полимеразу ВЭБ). Было выявлено, что клетки Дауди экспрессировали рецепторы ГК, передающих дексаметазон-зависимую положительную регуляцию уровня BZLF1 в мРНК. Этот эффект был ингибирован как антагонистом ГК рецепторов RU486, так и циклогексимидом.
Авторы делают вывод, что ГК в дополнение к индуцированной стрессовой иммунной дисрегуляции могут быть посредниками в реактивации латентного ВЭБ через индукцию гена BZLF1.
Активация инфламмасом при помощи протеина 16, индуцируемого интерфероном, при вирусной латентности I, II и III типа в В-клетках и эпителиальных клетках при инфекции вирусом Эпштейна-Барр
Ключевые слова: вирус Эпштейна-Барр, назофарингеальная карцинома, инфламмасома, клетки Раджи, каспаза-1
Источник: Ansari M.A., Singh V.V., Dutta S. et al. // J. Virol. - 2013. - Vol. 87, N 15. - P. 8606-8623.
PMID: 23720728
Вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) этиологически связан с онкологическими заболеваниями В-клеток человека и назофарингеальной карциномой (НФК). Установлено 3 типа латентности, которые обеспечивают их эписомальную геномную персистенцию и ускользание от иммунологических реакций хозяина. Врожденный инфламмасомный ответ распознает патоген-ассоциированный молекулярный паттерн, который приводит к соединению с цитоплазматическим сенсором, таким как NLRP3- или AIM2-протеины, или ядерным IFI16 с адаптером ASC-протеином и эффектором прокаспазой-1, что приводит в результате к активации каспазы-1, которая образует проформы воспалительных цитокинов (интерлейкинов) ИЛ-1β, ИЛ-18 и ИЛ-33.
Авторы из США провели исследование с целью изучения возможности инфламмасом распознавать и реагировать на геном ВЭБ внутри ядра. Результаты исследования были опубликованы в журнале "Journal of Virology".
Ученые наблюдали доказательства активации инфламмасом, такие как активация каспазы-1 и разделение на проИЛ-1β, ИЛ-18 и ИЛ-33 в латентности-I в клетках Раджи, латентности-II в клетках НФК C666-1 и латентности-III в лимфобластоидных клетках (ЛБК). Взаимодействие между ASC с IFI16, но не с AIM2 или NLRP3 было выявлено при всех латентностях и в случае ВЭБ-инфекции в первичных В-клетках человека. IFI16 и расщепленная каспаза-1, ИЛ-1β, ИЛ-18 и ИЛ-33 были обнаружены в экзосомах клеток Раджи и ЛБК. Через EBNA-1 и EBER общих для всех форм латентности ВЭБ, расщепленная каспаза-1 не выявлена в клетках, экспрессировавших EBNA-1, и блокирование транскрипции EBER не тормозило расщепление каспазы-1. При проведении FISH-анализа IFI16 группировался с геномом ВЭБ в ядрах ЛБК и клетках Раджи.
Авторы делают вывод, что устойчивое распознавание латентного генома ВЭБ с помощью IFI16 при всех типах латентности является результатом естественной индукции инфламмасом и созревания ИЛ-1β, ИЛ-18 и ИЛ-33.
Новый ВЭБ-ассоциированный гиперметилированный CPG ген рецептора соматостатина 1, участвующий в патогенезе ВЭБ-ассоциированного рака желудка
Ключевые слова: рецептор соматостатина-1, вирус Эпштейна-Барр, рак желудка, интерлейкин-8
Источник: Zhao J., Liang Q., Cheung K.F. et al. [1] Department of Medicine and Therapeutics, Institute of Digestive Disease, Li Ka Shing Institute of Health Sciences, The Chinese University of Hong Kong, Hong Kong, China [2] CUHK Shenzhen Research Institute, Shenzhen, China // Br. J. Cancer. - 2013, Jun 25. - Vol. 108, N 12. - Р. 2557-2564. doi: 10.1038/bjc.2013.263 [Epub 2013, May 30].
PMID: 23722468
Рецептор соматостатина-1 (РССТ1) преимущественно метилирован при раке желудка, ассоциированном с вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ), при помощи метилирования промоторной области.
Авторы из Китая провели исследование с целью анализа эпигенетического повреждения и биологической функции РССТ1 при ассоциированном с ВЭБ раке желудка (ВЭБаРЖ). Результаты исследования были опубликованы в журнале "British Journal of Сancer".
Метилирование промотера было исследовано с помощью комбинированного бисульфитного рестрикционного анализа (COBRA) и пиросеквенирования. Биологическая функция РССТ1 была оценена по увеличению или уменьшению значения результата функциональных проб.
Гиперметилирование промотора РССТ1 было обнаружено в ВЭБ-позитивной линии клеток рака желудка с замершей РССТ1 транскрипцией (AGS-ВЭБ), но не было обнаружено в ВЭБ-негативной линии клеток рака желудка с экспрессией РССТ1. Уровень экспрессии РССТ1 был восстановлен в AGS-ВЭБ путем воздействия на деметилирущий агент. Более того, уровень метилирования РССТ1 был значительно выше при ВЭБ-позитивном первичном раке желудка по сравнению с ВЭБ-негативным раком желудка (p=0,004). Блокирование РССТ1 в линиях клеток рака желудка (AGS или BGC823) повышало пролиферацию клеток и колониеобразующую способность и являлось промотором перехода G1-фазы в S-фазу, а также увеличивало миграцию клеток и инвазивную способность. В противоположность этому эктопическая экспрессия РССТ1 в линии клеток рака желудка (MKN28 и MGC803) заметно снижала рост клеток в условиях культивации и снижала размер опухоли у безтимусных мышей. Супрессивный эффект РССТ1 в отношении опухоли ассоциировался с повышенной экспрессией циклин-зависимых ингибиторов киназы (p16, p15, p27 и p21), сниженной экспрессией онкогенов (MYC и MDM2), пролиферацией ключевых клеток и регуляторов выживаемости (PI3KR1, AKT, BCL-XL и MET) и ингибированием генов миграции/инвазии [интегрины, MMP1 (матриксная метилпептидаза 1), PLAUR (рецептор урокиназы - активатора плазминогена) и ИЛ-8 (интерлейкин-8)].
Авторы делают вывод, что рецептор соматостатина-1 - супрессор опухоли, метилирование которого в клетках рака желудка запускается на генетическом уровне ВЭБ-инфекцией.