Гриппферон: от экспериментальных исследований до практического использования
РезюмеПроведен анализ многочисленных экспериментальных и клинических исследований противовирусной активности отечественного препарата на основе интерферона альфа-2 человеческого рекомбинантного (Гриппферон® капли назальные). В культуре клеток показана активность препарата против вирусов гриппа А различных серотипов, в том числе и против ремантадин-устойчивых штаммов, аденовирусной инфекции человека 6-го типа, вирусов краснухи, парагриппа 2-го типа, респираторно-синцитиального вируса, "мексиканского" пандемического вируса гриппа A/H1N1/09, вируса гриппа птиц H5N1. По результатам экспериментов на лабораторных животных доказана безопасность препарата, который не обладает эмбриотоксическим и тератогенным действием. Проанализированы результаты клинических исследований применения препарата у людей для лечения и профилактики гриппа и ОРВИ (более 40 тыс. человек, в том числе 80 беременных женщин, 1958 детей от 0 до 14 лет, 250 человек пожилого и преклонного возраста). Препарат Гриппферон® капли назальные рекомендован в качестве безопасного эффективного профилактического и лечебного средства при ОРВИ и гриппе во всех возрастных группах населения начиная с антенатального периода развития ребенка до пациентов преклонного возраста.
Ключевые слова:вирус гриппа, ОРВИ, заболеваемость, Гриппферон® капли назальные
Инфекц. бол.: новости, мнения, обучение. 2013. № 2. С. 124-131
Актуальность проблемы профилактики и лечения гриппа и других острых респираторно-вирусных инфекций (ОРВИ) определена их широкой распространенностью. В России на грипп и острые респираторные заболевания приходится свыше 90% от всей инфекционной заболеваемости [11]. По данным ВОЗ, ежегодно каждый взрослый человек в среднем 2 раза болеет гриппом или другими ОРВИ, школьник - 3 раза, ребенок дошкольного возраста - 6 раз. Заболевания гриппом и другими ОРВИ особенно тяжело протекают у пациентов с заболеваниями бронхолегочной и сердечно-сосудистой систем, у пожилых людей, детей, беременных женщин и нередко приводят к серьезным осложнениям [9]. В современных условиях респираторные заболевания являются преимущественно инфекциями тех организованных коллективов, где условия определяют активность механизма передачи возбудителей и гетерогенность состава людей. Смертность от гриппа и его осложнений занимает 1-е место среди всех инфекционных заболеваний [6]. В последние 60 лет не отмечено снижения показателей смертности, вызванной гриппозной пневмонией [10]. Суммарные потери ВВП вследствие заболеваемости ОРВИ и временной нетрудоспособности населения достигают 1,32% [1]. Исследования иммунопатогенеза гриппа и ОРВИ свидетельствуют, что вирусы гриппа, как и другие респираторные вирусы, грубо вмешиваются в сбалансированную систему цитокинов человека. Снижение иммунологической резистентности и глубокое подавление функциональной активности различных компонентов иммунной системы приводят к возникновению вторичных бактериальных осложнений [12]. Вирусы гриппа постоянно меняются в ходе взаимодействия с человеческим организмом, что определяет трудности создания универсальной вакцины против гриппа и ОРВИ. Арсенал препаратов для профилактики и лечения гриппа и ОРВИ весьма обширен [2], однако в последние годы в связи с нерациональной терапией все чаще наблюдается резистентность многих респираторных вирусов к химиопрепаратам. В условиях начавшейся эпидемии гриппа, когда все население подвергается риску заражения, необходимо проведение мероприятий по массовой защите людей средствами экстренной неспецифической профилактики [4, 7]. Для решения этой задачи большое значение имеют препараты, которые оказывают быстрое действие против всех возбудителей острых респираторных инфекций. При этом целесообразно использование средств, активирующих иммунитет, стабилизирующих и корригирующих адаптивный иммунитет и восстанавливающих систему цитокинов [8]. Среди многочисленных цитокинов, обладающих контрольно-регуляторными функциями, особое место отводится интерферонам (ИНФ) и их индукторам, которые защищают организм от инфицирования вирусами, бактериями, повышают активность лейкоцитов и макрофагов [5, 14]. Интерфероны - естественные факторы иммунологической защиты, вырабатываются самим организмом при его контакте с вирусами, бактериями, грибами и другими патогенами, их применение в качестве препаратов естественно для человека. В настоящее время созданы комбинированные препараты, в состав которых, помимо ИФН, входят дополнительные компоненты, улучшающие их фармакодинамику и повышающие эффективность. Отечественный препарат Гриппферон® капли назальные создан биотехнологической компанией ЗАО "Фирн М" (Москва) на основе интерферона альфа-2 человеческого рекомбинантного (в 1 мл препарата содержится не менее 10 000 ME интерферона альфа-2), представляет собой белок с молекулярной массой 19 300 дальтон, синтезированный штаммом E.Coli, в генетический аппарат которого встроен ген человеческого альфа-2 интерферона лейкоцитарного (Инструкция по медицинскому применению Минздрава РФ от 24.02.1999, регистрационный номер Р № 000089/01-2000). Препарат Гриппферон® капли назальные действует в месте первичного внедрения и размножения респираторных вирусов - в эпителиальных клетках слизистой оболочки носа. Специальные полиэлектролитные добавки, широко применяемые в медицине, обеспечивают надежную фиксацию препарата на слизистой носа и способствуют восстановлению проходимости носовых ходов [3].
Цель данной работы - обобщение результатов лечебной и профилактической противовирусной эффективности препарата Гриппферон® капли назальные, которые были получены на разных этапах клинических испытаний, пострегистрационных исследований и опыта применения лекарственного препарата в практике здравоохранения.
Материал и методы
Методическую основу исследования составил ретроспективный анализ с использованием комплекса методов: аналитического, документального, экспертного, контентанализа, социологического опроса. Источники информации - данные клинических и наблюдательных испытаний (24 единицы), имеющихся в Научно-исследовательском центре Биотехнологической компании ЗАО "Фирн М" за период 1998-2013 гг.
Результаты и обсуждение
Экспериментальные исследования
Доклинические, дорегистрационные исследования, проведенные в 1990-1999 гг. на базе Российского акционерного общества "Биопрепарат", Института инженерной иммунологии на экспериментальных животных (мыши, морские свинки, кролики), показали, что лекарственное вещество Гриппферон не обладало острой и хронической токсичностью, местнораздражающим и пирогенным действием. Исследование острой токсичности было выполнено по открытой методике Ноакеса и Сандерсона [29] (40 самцов и самок морских свинок, массой 250-300 г, имеющих белый шерстяной покров) в трех опытных группах сравнения. Одновременно в опытных группах животным наносили лекарственное вещество на выстриженный участок кожи спины площадью 30 см2 в дозах 10,7 и 5 мг/кг массы животного, что соответствовало 10,7 и 5 суточным дозам для человека. В контрольной группе на выстриженный участок кожи наносили в том же объеме 0,9% водный раствор натрия хлорида. Наблюдение в течение 24 ч и последующих 14 дней показало, что в опытных группах и контрольной не наблюдали гибели экспериментальных животных с равноценной скоростью весового прироста. Местнораздражающее действие Гриппферона было изучено на белых кроликах (n=11), массой 2,8-3,0 кг. Кожные пробы ставили по методу Драйза на 6 кроликах, а конъюнктивальную пробу проводили по модифицированному методу Драйза на 5 кроликах [29]. Установлено, что исследуемый препарат не обладал раздражающим эффектом как при постановке внутрикожной, так и конъюнктивальной пробы.
Определение пирогенных свойств Гриппферона было проведено на здоровых беспородных кроликах обоего пола массой тела 2-2,5 кг согласно методике Государственной фармакопеи ХI издания [27]. В опытной группе (n=6) препарат вводили в дозе 1,4Ч102 МЕ/кг, что соответствует максимальной суточной дозе, рекомендуемой для человека, а в контрольной (n=3) - в том же объеме 0,9% водный раствор натрия хлорида. Суммарное повышение температуры тела экспериментальных животных не превышало 3,2°С. Согласно требованиям Фармакологического комитета РФ на доклиническом этапе изучения лекарственных препаратов необходимо определение токсичности [28] изучаемого лекарственного вещества. Для выполнения этого требования были проведены эксперименты на крысах, которым многократно вводили Гриппферон, что позволило оценить как ранние, так и отсроченные реакции экспериментальных животных с позиций выявления органов-мишеней токсического действия препарата. При этом учитывали возможность развития побочных токсических эффектов, которые могут возникать при длительном клиническом применении высоких доз препарата, в том числе развитие гиперчувствительности к нему. Терапевтическая безопасность применения Гриппферона была оценена на крысах обоего пола массой 200-220 г линии Вистар (n=240) с учетом комплекса клинических, гематологических, биохимических и патоморфологических показателей. Экспериментальные животные были разделены на шесть подопытных и две контрольные группы, которым в течение 15 дней внутрибрюшинно вводили лекарственный препарат в трех разных дозах, соответствующих среднесуточной дозе для человека, превышающей ее в 10 и в 100 раз, т.е. 1,4Ч102; 1,4Ч103 и 1,4Ч104 МЕ/кг соответственно.
В ходе эксперимента на 7, 15 и 30-й дни брали кровь. Исследовали морфологический состав периферической крови, биохимические показатели (общий белок, альбумин, уровень глюкозы, креатинина, мочевины, аланин- и аспартаттрансаминазы, щелочной фосфатазы), иммунологический статус методами, изложенными в методических рекомендациях ГИСК им. Л.А. Тарасевича [23].
Анализ экспериментального материала показал отсутствие токсического влияния Гриппферона на общее состояние, изменение поведения в опытной группе животных, не было выявлено также отрицательной динамики массы тела. Система кроветворения и свертываемость крови были в пределах физиологических норм. Гриппферон не оказывал влияния на углеводный и белковый обмен, на биохимические показатели, характеризующие функции паренхиматозных органов. Однако в ходе эксперимента было обнаружено некоторое стимулирующее действие исследуемого препарата на пролиферацию Т- и В-клеток в реакции бласттрансформации с усилением активности перитонеальных макрофагов. Патологоанатомическое исследование органов и тканей экспериментальных животных показало, что в дозах, которые соответствовали 1, 10 и 100 терапевтическим дозам, рекомендуемым для человека, Гриппферон не обладал токсическим действием на органы и системы экспериментальных животных. Материалы, полученные в экспериментах на животных в ходе доклинического этапа изучения острой и хронической токсичности, пирогенных свойств, местнораздражающего действия, эмбриотоксического и тератогенного эффектов у препарата Гриппферон позволили сделать правомочный вывод о безопасности препарата и возможности отнесения его к классу практически нетоксичных веществ.
В экспериментах на клеточных культурах была оценена противогриппозная активность препарата Гриппферон® капли назальные с использованием вирусов гриппа А различных серотипов (отчет ГУ НИИ гриппа РАМН, 2003-2008 гг.). Установлено, что активность препарата в различной степени проявлялась в отношении всех имеющихся вирусов в коллекции НИИ гриппа РАМН [А/Красноярск/18/05 (H1N1), А/Спб/03/05 (H1N1), А/Красноярск/8/05 (H1N1), А/Новосибирск/5/05 (H1N1), А/Новосибирск/4/04 (H3N2), A/Panama/2077/99 (H3N2), A/Puerto Rico/8/34 (H1N1), A/swine/1976/31 (H1N1)], в том числе и против ремантадин-устойчивых штаммов. Препарат Гриппферон® капли назальные стабильно подавлял репликацию вирусов в клетках А549 с выраженным снижением их титра. При этом выявлено, что ни одна из концентраций препарата, вплоть до 5000 МЕ/мл, не оказывала токсического действия на клетки А549. По представленным в отчетах данным, противовирусная активность препарата Гриппферон® капли назальные была выявлена также на модели аденовирусной инфекции 6-го типа в культуре клеток, коронавирусной инфекции, а также вируса гриппа птиц H5N2. Ингибирование вирусной репродукции показано на модели хорионаллантоисных оболочек куриных эмбрионов при учете цитопатогенного действия в культуре клеток и подтверждено при помощи иммуноферментного анализа. В культуре клеток показано наличие у препарата прямой ингибирующей активности, которая проявлялась как в дозозависимом снижении репликации вирусов в присутствии препарата, так и в снижении инфекционного титра вирусного потомства, при этом химиотерапевтичес-кий индекс Гриппферона был равен 10.
В отчете Вирусологического центра НИИ микробиологии Министерства обороны РФ (2006 г.) об экспериментальном исследовании активности препарата Гриппферон® капли назальные в отношении экспериментальной инфекции гриппа птиц показано, что результаты лабораторного исследования также подтверждали эффективное подавление репродукции вируса гриппа А подтипа H5N1 в культуре клеток MDCK при внесении за 4 ч до инфицирования, а также через 2 ч после инфицирования монослоя клеток при использовании препарата в схемах экстренной профилактики и лечения в концентрации не менее 3300 ME. В ходе анализа данных отчета ФГУН "Санкт-Петербургский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера" Роспотребнадзора "Экспериментальное исследование активности препарата Гриппферон® капли назальные в отношении вирусов краснухи, парагриппа 2-го типа и респираторно-синцитиального вируса" (2008 г.) также было выявлено, что данный препарат обладал выраженным дозозависимым вирусингибирующим действием против этих типов вирусов. Экспериментальные исследования активности препарата Гриппферон® капли назальные в отношении "мексиканского" пандемического вируса гриппа A/H1N1/09, проведенные in vitro и представленные в отчете филиала ФГУ 48 ЦНИИ Минобороны России - ВЦ (2010 г.), свидетельствуют, что в культуре клеток MDCK в начальные сроки после инфицирования данный препарат полностью подавлял репродукцию вируса гриппа, штамм A/California/07/09 (H1N1) в концентрации 1Ч104 МЕ/мл при внесении его в культуральную среду как до инфицирования, так и после. На пике накопления вируса в клетках при внесении Гриппферона за 24 ч до инфицирования отмечалось подавление цитопатического действия вируса на 70%. При внесении исследуемого интерферона в культуральную среду через 1 ч после инфицирования монослоя клеток его эффективность по подавлению ЦПД-вируса составила 60%. Полученные результаты противовирусной эффективности исследуемого интерферона сопоставимы с таковыми для Реаферона-ЕС и Ральдирона.
Таким образом, полученные в экспериментальных исследованиях данные показали безопасность препарата и его противовирусную эффективность, что дало основание перейти к клиническому этапу дорегистрационных исследований. Клинические исследования Клинические исследования препарата Гриппферон® капли назальные проводили в несколько этапов по 2 направлениям, а именно: оценка лечебной эффективности и оценка профилактической эффективности. Результаты этих исследований представлены в 24 отчетах различных учреждений здравоохранения и социальной защиты, клиник высших учебных заведений, научно-исследовательских институтов и различных ведомств, в том числе железнодорожных, военных. Как показали сводные данные, в испытаниях приняли участие более 40 000 человек. Анализ отчетов о профилактической и лечебной эффективности препарата показал, что в проведенном исследовании приняли участие различные категории населения:
- возрастные группы от детей с первых суток жизни до лиц старше 60 лет;
- беременные женщины;
- представители различных социально-профессиональных категорий (организованные коллективы, в том числе воинские, гражданские, внутрибольничная среда, семьи и др.).
В ходе проведенных исследований был показан однотипно направленный высокий профилактический и лечебный эффект с отсутствием нежелательных явлений. Клинический этап дорегистрационных исследований был проведен на 60 курсантах Военного университета Министерства обороны РФ. В двойном слепом рандомизированном клиническом исследовании сравнили безопасность и переносимость экспериментальной серии препарата Гриппферон® капли назальные по отношению к Реаферону® (для инъекции сухой), который служил референс-препаратом [30], так как действующим началом этого препарата так же, как и в экспериментальном лекарственном препарате Гриппферон, явился интерферон альфа-2 человеческий рекомбинантный, обладающий противовирусной активностью [24, 25, 31] . С целью выравнивания действующего начала референс-препарат был разведен 0,9% водным раствором натрия хлорида, возможность использования которого утверждена Инструкцией МЗ РФ по применению препарата Реаферон® при местном использовании [30], до содержания в 1 мл такого же количества интерферона альфа-2b человеческого рекомбинантного (10 000 МЕ), как и в исследуемом лекарственном препарате Гриппферон®. Местное действие оцениваемого препарата и референс-препарата было подтверждено отсутствием увеличения содержания интерферона в крови при исследовании парных сывороток крови в экспериментальной и контрольной группах, а также данными об отсутствии противоинтерфероновых антител в крови в реакциях нейтрализации противовирусной активности интерферона на перевиваемой линии клеток L-41.
Анализ данных отчета ОАО "Института инженерной иммунологии" за 1998-1999 гг. показал, что препарат Гриппферон® капли назальные обладал высокой противовирусной активностью, так как при исследовании образцов слюны, полученных от контрольной группы (назначение Гриппферона®), был обнаружен прирост титра противовирусной активности в 60% случаев, что было в 1,7 раза больше, чем в группе контроля с применением Реаферона®.
Более выраженное местное действие Гриппферона, как указывали исследователи, было связано с тем, что в его основе лежит новая комбинация интерферона альфа-2b человеческого рекомбинантного с полимерными соединениями (поливинилпирролидон и полиэтиленоксид), составляющими водорастворимую вспомогательную часть препарата [3, 26], так как и оцениваемый препарат, и референс имели одинаковую действующую "интерфероновую" часть и одинаковую схему применения. Введение в состав препарата полимерных соединений обеспечивало более продолжительный контакт интерферона со слизистой поверхностью носовой полости, что способствовало более выраженной индукции интерферона и, следовательно, более высокой степени защиты организма от вирусной инфекции [3]. Проведенные доклинические и клинические исследования явились основой для государственной регистрации препарата Гриппферон® капли назальные (интерферона альфа-2b человеческого рекомбинантного, регистрационное удостоверение МЗ РФ Р № 000089/01-2000).
Пострегистрационное клиническое исследование, выполненное по программе, утвержденной 28.12.98 комитетом по биоэтике ФГУН "Государственный научноисследовательский институт стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А. Тарасевича", в больнице им. Св. Владимира МОНИКИ (отделение детских инфекций), позволило получить материалы о лечебной и профилактической эффективности, безопасности и переносимости препарата Гриппферон® у детей. Всего под наблюдением находились 160 детей с ОРВИ (по 80 человек в опытной и контрольной группах в возрасте от 1 года до 14 лет).
Опытная группа получала интраназально Гриппферон®, контрольная - плацебо (водорастворимая часть препарата, содержащая вспомогательные вещества). Назначение Гриппферона® с профилактической целью в период пребывания в стационаре предупреждало развитие респираторных внутрибольничных инфекций, а также препятствовало заболеванию ОРВИ в течение последующих двух недель после выписки из стационара в 2,5 раза чаще, чем в контрольной группе.
Сравнительный анализ клинического течения ОРВИ на фоне приема Гриппферона® показал, что происходило достоверное сокращение сроков гиперемии слизистых ротоносоглотки, длительности ринита и периода регистрации хрипов в легких (р<0,05) с сокращением продолжительности местных проявлений ОРВИ на 1-2 дня.
У детей опытной группы на фоне применения Гриппферона® повторные ОРВИ протекали, как правило, в легкой форме и не требовали госпитализации, в отличие от детей, заболевавших после приема плацебо. Кроме того, по данным анализа материалов отчета, выявлено, что Гриппферон® и плацебо хорошо переносились больными детьми, побочных и аллергических реакций (местных и общих) не отмечено ни у одного ребенка.
Полученные результаты клинического исследования реализованы в утвержденной Министерством здравоохранения РФ Инструкции по применению препарата Гриппферон®капли назальные от 01.02.2000.
В последующих пострегистрационных исследованиях были уточнены показания к применению Гриппферона® в группе детей до одного года и у беременных женщин. Такие клинические контролируемые исследования были проведены на базе ФГБУ "Научно-исследовательский институт гриппа" Министерства здравоохранения Российской Федерации в 2001-2002 гг.
Этиологию ОРВИ устанавливали с помощью иммунофлуоресцентного экспресс-метода, иммуноферментного анализа (ИФА) образцов смывов из пазух носа, а также серологически в парных сыворотках крови в реакции связывания комплемента (РСК), реакции торможения гемаглютинации (РТГА), реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) c широким набором антигенов (гриппозных, парагриппозных, адено-, РС-, коронавирусов и микоплазмы пневмонии).
Дополнительными методами оценки клинической эффективности изучаемого препарата являлись следующие показатели лабораторных исследований, регистрируемые в динамике наблюдения данные клинических анализов крови, мочи, уровни иммуноглобулина класса Е в сыворотках крови детей, выявление вирусных антигенов в образцах эпителиальных клеток носовых ходов и специфических антител в носовых смывах и парных сыворотках крови. О профилактической эффективности судили по показателям заболеваемости детей (частота и тяжесть осложнений), а также по возникновению внутрибольничных инфекций. Клиническими базами оценки лечебной и профилактической эффективности препарата Гриппферон® при гриппе и острых респираторных инфекциях у детей в возрасте до 1 года и с 1 года до 3 лет являлись СПБ ГБУЗ "Детская городская больница Святой Ольги" (155 детей в возрасте от 2 мес до 3 лет, в том числе опытная группа - 90 детей, контрольная - 65 детей с применением только симптоматического лечения), Дом ребенка № 7 Красносельского района Санкт-Петербурга (127 детей в возрасте от 5 мес. до 3 лет, в том числе опытная группа из 73 детей, у 58 из которых проведено 2 курса профилактики). Анализ полученных материалов показал, что интраназальное введение интерферона альфа-2 человеческого рекомбинантного способствовало сокращению периода выявления вирусных антигенов в ИФ-исследовании, в образцах смывов из носовых ходов уже через 2 дня после начала лечения, а также отсутствие микст-инфекции при проведении повторных ИФ-исследований. В то же время у детей контрольной группы достоверно чаще регистрировали развитие внутрибольничных респираторных инфекций. По итогам апробации профилактической эффективности (курс введения 10 дней 2 капли 2 раза в день) выявлено, что различия в частоте регистрации ОРЗ среди детей, получавших препарат, и в контрольной группе достоверны (индекс эффективности составил 2,1).
В 2003 г. на базе ГБОУ ВПО "Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского" Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию и ГБОУ ВПО "Нижегородская государственная медицинская академия" Минздрава России были проведены клинические исследования по оценке эффективности лечения ОРВИ и гриппа препаратом Гриппферон® капли назальные среди детей до одного года (Протокол МЗ РФ 16.04.2003 № 105).
Под наблюдением находилось 52 ребенка, больных гриппом или ОРВИ (детские поликлиники № 1 и 10). Опытная группа получала препарат Гриппферон® капли назальные по 1 капле в каждый носовой ход 5 раз в день, контрольная - лейкоцитарный человеческий интерферон по 5 капель в каждый носовой ход 5 раз в день. Дети в наблюдаемых группах были сопоставимы по степени тяжести заболевания. В ходе исследования было выявлено отсутствие побочных реакций и осложнений после перенесенных ОРВИ как в контрольной, так и в опытной группе, а динамика показателей крови и мочи соответствовала возрастным нормам, что свидетельствовало об одинаковости риска использования препаратов. При анализе пользы применения препаратов было установлено, что у большинства детей обеих групп длительность заболевания колебалась от 5 до 8 дней. Однако при использовании лекарственного препарата Гриппферон® капли назальные у детей с легкой и среднетяжелой формами болезни выздоровление наступало раньше в 2-2,5 раза и в 1,5-2,0 раза реже отмечалось затяжное течение ОРВИ (до 9-10 сут). Полученные результаты позволили сделать вывод о сопоставимости эффективности препарата Гриппферон® капли назальные с эффективностью лейкоцитарного человеческого интерферона при лечении ОРВИ легкой и средней степени тяжести у детей первого года жизни, но по срокам выздоровления отмечена тенденция более высокой клинической эффективности препарата Гриппферон® капли назальные, что свидетельствовало о лучшем соотношении риск/польза. Аналогичные результаты клинической эффективности использования Гриппферона® капли назальные у детей были получены при проведении открытого параллельного рандомизированного исследования в Нижнем Новгороде. В исследовании приняли участие 20 детей не старше 1 года, больных ОРВИ, наблюдавшихся амбулаторно в детских поликлиниках № 8 и № 49.
Проведенная оценка клинической эффективности Гриппферона® капли назальные среди детей на 2 территориях в различных медицинских учреждениях позволила уточнить схемы назначения препарата детям в возрасте до 1 года, что нашло отражение в Инструкции по применению препарата Гриппферон® капли назальные (интерферон альфа-2b человеческий рекомбинантный), утвержденной Министерством здравоохранения и социального развития РФ от 04.01.2004.
В 2004-2005 гг. были проведены клинические исследования лечебной и профилактической эффективности Гриппферона® капли назальные при ОРВИ и гриппе у беременных женщин (Разрешение Министерства здравоохранения и социального развития РФ от 06.05.2004 № 135).
Данное исследование включало 2 этапа и было выполнено в ГБОУ ВПО "Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского" Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию. 1-й этап - эксперимент на животных по определению эмбриотоксического и тератогенного эффектов лекарственного препарата Гриппферон® капли назальные. 2-й этап - проспективное плацебо-контролируемое пострегистрационное клиническое исследование лечебной эффективности, переносимости и безвредности препарата Гриппферон® капли назальные в терапии острых респираторных вирусных инфекций и гриппа у беременных женщин. Дизайн экспериментального исследования на животных: беременные крысы линии Вистар (n=240) были разделены на 3 опытные группы. В опытных группах Гриппферон® вводили внутрибрюшинно 1 раз в сут. в течение всей беременности в разных дозах (соответственно 1,4Ч104 МЕ/кг массы тела, 1,4Ч103 МЕ/кг, 1,4Ч102 МЕ/кг), а в контрольной группе в том же объеме вводили 0,9% водный раствор натрия хлорида.
В ходе эксперимента оценивали динамику изменения массы тела беременных крыс, содержание эритроцитов и гемоглобина в крови, состояние и поведение беременных самок. Кроме этого были проанализированы результаты патологоанатомического вскрытия (349 плодов крысят). У половины беременных самок беременность была доведена до родов, получено 355 живых здоровых крысят.
Анализ полученных экспериментальных материалов показал, что не было выявлено статистически значимых различий в опытных и контрольной группах беременных крыс по оцениваемым показателям (пред- и постимплантационная эмбриональная смертность, морфологические пороки развития, общая задержка развития плодов), что позволило сделать вывод об отсутствии эмбриотоксичности и тератогенного эффекта у лекарственного препарата Гриппферон® капли назальные. Подтверждение безвредности препарата Гриппферон® капли назальные в эксперименте на беременных крысах позволило перейти ко второму этапу клинической оценки эффективности лекарственного препарата у беременных женщин, который был расширен и проведен параллельно на 2 клинических базах. В протокол исследования были включены 50 беременных женщин с симптомами ОРВИ и гриппа в Саратове и 30 - в Нижнем Новгороде. Наблюдаемые пациентки были разбиты на 2 группы. В группе сравнения, согласно инструкции, назначали интраназально Гриппферон® сразу после установления клинического диагноза грипп или ОРВИ. В контрольной группе - плацебо (водорастворимая часть препарата, содержащая вспомогательные вещества препарата Гриппферон®). В обеих группах побочных эффектов не выявлено ни у одной из беременных женщин. Лучшая клиническая эффективность была получена при применении препарата Гриппферон® капли назальные, что выразилось в более быстром (на 1-2 дня) купировании субъективной и объективной симптоматики ОРВИ.
Лечение среднетяжелых форм ОРВИ препаратом Гриппферон® капли назальные позволило сократить длительность заболевания до 5 дней у всех пациенток, при плацебо - течение инфекционного процесса более 5 дней. Проведенные клинико-лабораторные исследования пациенток, получивших препарат Гриппферон® капли назальные в комплексной терапии гриппа и других ОРВИ, показали, что препарат обладал выраженной лечебной эффективностью, особенно если терапия была начатав первые 2 суток заболевания, при этом сокращалась продолжительность лихорадочного периода (3,75±0,61 против 5,93±0,67 дня в группе плацебо), гиперемии зева (2,86±0,45 против 4,25±0,63 дня в группе плацебо), интоксикации и длительность заболевания в целом (3,8±0,93 дня против 5,22±0,76 в группе плацебо).
Использование исследуемого препарата и плацебо не вызвало в исследуемых группах каких-либо побочных и аллергических реакций. Данные о клинической эффективности Гриппферона® в комплексном лечении гриппа и ОРВИ у беременных женщин нашли свое отражение в утвержденной Министерством здравоохранения и социального развития РФ Инструкции по применению препарата Гриппферон® капли назальные (интерферон альфа-2 человеческий рекомбинантный) от 31.10.2005.
Профилактическая эффективность применения препарата Гриппферон® капли назальные в период сезонного подъема заболеваемости ОРВИ и гриппом среди гражданского населения и в воинских коллективах была оценена в течение 1999-2001 гг. среди 4308 человек на территории г. Москвы, Московской области, г. Ярославля и г. Ульяновска. Индекс профилактической эффективности в среднем составлял 3,4 с диапазоном колебания от 2,1 до 5,0.
Подтверждением профилактической и клинической эффективности лекарственного препарата Гриппферон® капли назальные могут служить многочисленные публикации [5, 13, 15, 17, 18, 20-22]. Особо следует выделить рандомизированное клиническое исследование, которое было проведено в 2006-2010 гг. сотрудниками отделения патологии новорожденных и недоношенных детей детской клиники ФГБУ "Ивановский НИИ материнства и детства им. В.Н. Городкова" Министерства здравоохранения РФ [22].
Рандомизация новорожденных детей была проведена на основании таблиц случайных чисел. В 4 сформированные группы наблюдения вошли: 52 ребенка, родившихся с массой тела более 1500 г, которым с профилактической целью по схеме, указанной в инструкции, применяли препарат Гриппферон® капли назальные (группа 1), 52 ребенка, родившихся с массой тела более 1500 г, без применения препарата (группа 2); 57 детей, родившихся с очень низкой или экстремально низкой массой тела, с профилактическим применением препарата Гриппферон® капли назальные (группа 3); 57 новорожденных в возрасте 1-6 день, родившихся с очень низкой или экстремально низкой массой тела, без профилактического применения препарата (группа 4).
Во всех группах ежедневно оценивалась активность ребенка, весовые прибавки, наличие срыгиваний, температура тела, состояние кожных покровов и видимых слизистых, а также физикальные данные обследования внутренних органов, частота и выраженность местных и системных реакций, количество случаев нежелательных явлений; лабораторные показатели.
Гриппферон® капли назальные для профилактики ОРВИ и гриппа применялся согласно инструкции.
Анализ клинических материалов показал, что объективных симптомов ОРВИ и гриппа не было зарегистрировано ни у одного ребенка, так как состояние слизистой носа, по данным инструментального обследования (передней риноскопии), состояние зева, по данным осмотра носоглотки, было в пределах нормы. Среди детей, родившихся с низкой массой тела и контактировавших с больными ОРВИ, получавших профилактически препарат Гриппферон® капли назальные, не заболели ОРВИ 38,5% детей, а в группе сравнения не заболели только 3,8% (р<0,001). Индекс профилактической эффективности составил 1,5.
Были отмечены достоверные различия в количестве не заболевших ОРВИ детей среди родившихся с очень низкой и экстремально низкой массой тела и получавших профилактику препаратом Гриппферон® капли назальные: по сравнению с контрольной группой (47,4 против 13,6% в группе сравнения; р<0,001). Индекс профилактической эффективности - 3,9. Таким образом, проведенные многочисленные экспериментальные и клинические исследования отечественного препарата Гриппферон® капли назальные позволяют рекомендовать его в качестве безопасного эффективного профилактического и лечебного средства при ОРВИ и гриппе во всех возрастных и физиологических группах населения начиная с антенатального периода развития ребенка до лиц преклонного возраста. Полученные результаты противовирусной активности препарата в отношении различных типов вирусов могут служить основанием для более широкого и углубленного изучения действия препарата Гриппферон® капли назальные на других возбудителей актуальных вирусных инфекций для оценки его профилактической и лечебной эффективности.
Литература
1. Белоусов Ю.Б., Карпов О.И., Леонова М.В. и др. Клиникоэкономическая оценка средств, применяемых для профилактики и лечения ОРВИ // Качественная клиническая практика. - Спецвыпуск "Профилактика и лечение ОРВИ". - 2002.
2. Веревщиков В.К., Борзунов В.М., Шемякина Е.К. Современные иммуномодуляторы в лечении больных острыми респираторными заболеваниями, осложненными внебольничной пневмонией // Инфекционные болезни.- 2007. - т. 5. - №3. - С. 20-22.
3. Гапонюк П.Я., Дорошенко Е.М. Роль российского препарата ГРИППФЕРОН® в лечении и профилактике гриппа и других ОРВИ // Поликлиника. - 2008. - № 5. - С. 22-26.
4. Дриневский В.П., Осидак Л.В., Цыбалова Л.М. Острые респираторные инфекции у детей и подростков // Практическое руководство - СПб.: СпецЛит. - 2003. - 182 с.
5. Ершов Ф.И., Киселев О.И. Интерфероны и их индукторы (от молекул до лекарств). - М.: ГЭОТАР-Медиа. - 2005. - 368 с. - И. Грипп: диагностика и лечение // РМЖ. - 2008. - Т. 16. - № 22. - С. 1494-1497.
6. Кареткина Г.Н. Применение индукторов интерферонов для лечения и профилактики гриппа и других острых респираторных вирусных инфекций // Лечащий врач. - 2009. - № 10. С. 36-41.
7. Карпухин Г.И., Карпухина О.Г. Диагностика, профилактика и лечение острых респираторных заболеваний. - СПб.: Гиппократ. - 2000. - 184 с.
8. Маркова Т.П. Актуальные проблемы профилактики и лечения гриппа // РМЖ. - 2004. - Т. 12. № 21. - С. 1183-1187.
9. Маркова Т.П., Чувиров Г.Н. Вакцинопрофилактика и противовирусная терапия гриппа // РМЖ. - 2008. - С. 142.
10. Онищенко Г.Г. Эпидемическая обстановка в Российской Федерации и основные направления деятельности по ее стабилизации. - М., 2002. - С. 24-25.
11. Романцов М.Г., Сологуб Т.В. Тактика терапии и подходы к экстренной профилактике при гриппе и ОРВИ // Лечащий врач. - 2007. - № 8. - С. 55-58.
12. Гапонюк П.Я., Щипанова А.И., Литвиник Я.А. Гриппферон, капли в нос для лечения и профилактики гриппа у детей раннего возраста // Аллергология и иммунология. - 2007. - № 8 (1). - С. 72-80.
13. Горелов А.В., Феклисова Л.В., Грачева Н.М. Иммунотропная терапия острых респираторных вирусных инфекций в педиатрической практике - опыт клинического применения препаратов интерферона альфа // Сjnsilium Medicum. - Педиатрия, 2001. - № 1. - С. 45-54.
14. Феклисова Л.В. Клинико-лабораторная оценка использования препаратов интерферона у детей с острой респираторной патологией в лечебных и оздоровительных учреждениях // Эпидемиология и инфекционные болезни. Актуальные вопросы. - 2012. - № 1. - С. 71-75.
15. Белокриницкая Т.Е., Чарторижская Н.Н., Лига В.Ф. и др. Оценка эффективности профилактики и лечения гриппа у беременных в период пандемии 2009 года // Эффективная фармакотер. в акуш. и гин. - 2010. - № 3. - С. 52-54.
16. Блохин Б.М., Королоев А.В., Копылева О.Д. и др. Применение рекомбинантного интерферона у детей с острой респираторной вирусной инфекцией // Материалы 4-го конгр. педиатров-инфекционистов России "Актуальные вопросы инфекционной патологии у детей (диагностика и лечение)". - М., 2005. - С. 37-38.
17. Гапонюк П.Я., Щипанова А.И. Применение интерферона альфа-2 в педиатрической практике // Материалы ХI конгр. педиатров России "Актуальные проблемы педиатрии". - М., 2007. - С. 159-160.
18. Болотова Н.В., Краснов В.В., Кузин В.Б. и др. Лечение О