Современная эпидемиологоэпизоотологическая ситуация по иксодовым клещевым боррелиозам в Самарской области

• Кулагина Анастасия Павловна
• Чеканова Татьяна Александровна
• Вандышева Татьяна Владимировна
• Титков Антон Владимирович
• Раков Алексей Владимирович
• Суздальцев Алексей Александрович

Резюме

В Самарской области ежегодно регистрируются случаи иксодовых клещевых боррелиозов у пациентов, пострадавших от присасывания иксодовых клещей, что послужило основанием для проведения данного исследования.

Цель работы - анализ эпидемиолого-эпизоотологической ситуации по иксодовым клещевым боррелиозам в Самарской области.

Материал и методы. Использованы формы официальной статистики Роспотребнадзора. Методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени исследовали клещей на наличие возбудителей клещевых инфекций. Проведены пилотное генотипирование 39 образцов ДНК боррелий с использованием комплексного похода методом секвенирования по Сэнгеру и филогенетический анализ.

Результаты и обсуждение. Заболеваемость иксодовыми клещевыми боррелиозами в Самарской области носит спорадический характер. Проведено ранжирование районов по показателям заболеваемости. Показатели инцидентности наиболее высокие в крупных городах и районах области с умеренным климатом и преобладанием лесных массивов (лесостепи), благоприятных для распространения клещей рода Ixodes. Впервые в регионе проведено избирательное генотипирование ДНК боррелий, выделенных из клещей, снятых с людей. В исследуемых образцах был типирован вид B. аfzelii, который встречался в городах Сызрань, Жигулевск и в Сергиевском районе области. Вид B. miyamotoi впервые был обнаружен на территории в Борском, Кинельском, Шенталинском, Ставропольском и Волжском районах.

Заключение. Ландшафтные и климатические условия в ряде районов северной и центральной частей области способствуют сохранению высоких рисков инфицирования населения боррелиями. Пилотное генотипирование боррелий свидетельствует о распространении в Самарской области как минимум двух видов - В. miyamotoi из группы клещевых возвратных лихорадок и B. аfzelii из группы Лайм-боррелиозов. Следует обратить внимание на необходимость лабораторной верификации безэритемных форм заболевания.

Ключевые слова: эпидемиология; боррелии; генотипирование; иксодовые клещевые боррелиозы; Самарская область

Среди трансмиссивных инфекций иксодовые клещевые боррелиозы (ИКБ) лидируют по встречаемости в Российской Федерации. В 2022 г. показатель заболеваемости ИКБ по стране приблизился к среднемноголетнему (5,17 на 100 тыс. населения доковидного периода 2010-2019 гг.) и составил 4,98 на 100 тыс. населения [1, 2]. Боррелиозы в острой стадии могут протекать как в эритемной, так и в безэритемной форме [3, 4]. Однако даже кожные проявления при эритемных формах ИКБ могут быть атипичными, маскируясь под другие патологии [5, 6]. Безэритемные формы ИКБ бывают вызваны не только видами боррелий из группы Лайма, но и отнесенными к группе клещевых возвратных лихорадок [7, 8].

Самарская область - крупный регион Поволжья, занимающий 12‑е место в Российской Федерации по численности населения. Умеренно континентальный климат благоприятен для обитания иксодовых клещей, в том числе рода Ixodes - основного переносчика возбудителя ИКБ. В области ежегодно регистрируют случаи заболевания ИКБ с тенденцией к росту уровня заболеваемости [9]. Учитывая сложность лабораторного подтверждения ИКБ, в особенности безэритемных форм, представляется важным современно оценивать меняющуюся эпидемиолого-эпизоотологическую ситуацию в Самарской области для планирования мероприятий риск-ориентированного надзора за боррелиозами на региональном уровне.

Цель исследования - анализ текущей эпидемиолого-эпизоотологической ситуации по ИКБ в Самарской области.

Материал и методы

В работе использованы данные статистического наблюдения за заболеваемостью населения ИКБ и регистрации случаев пострадавших от присасывания клещей в регионе (формы официальной статистики Роспотребнадзора и сведения ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в Самарской области" Роспотребнадзора).

Присосавшихся клещей, снятых с людей, исследовали в ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии по Самарской области" Роспотребнадзора методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени на наличие в них Borrelia burgdorferi sensu lato с применением коммерческого набора реагентов "АмплиСенс® TBEV, B. burgdorferi s.l., A. phagocytophilum, E.chaffeensis/E.muris-FL" производства ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора. Выделение нуклеиновых кислот проводили, используя набор реагентов "Рибо-преп" (ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора).

Впервые проведено пилотное генотипирование 39 образцов ДНК B. burgdorferi s.l., обнаруженных в клещах, снятых с населения, пострадавших от их присасывания в разных районах Самарской области. Для этого была использована апробированная в ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора методика анализа участка межгенного спейсера 5S-23S rRNA методом двухраундовой nested-ПЦР с последующими секвенированием и филогенетическим анализом. С использованием набора реагентов "Реверта-L" (ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, Россия) были получены комплементарные ДНК (кДНК) для последующего проведения nested-ПЦР. Для первого раунда ПЦР использовали праймеры Out-IGSa (CgA CCT TCT TCg CCT TAA AgC) и Out-IGSb (AgC TCT TAT TCg CTg ATg gTA). Матрицей на первом этапе служила кДНК. На втором этапе в состав ПЦР-смеси входили праймер Inn-IGSe (CCT TAA AgC TCC TAg gCA TTC ACC A) и Inn-IGSd (CgC ggg AgA gTA RgT TAT TgC gA), матрицей были продукты амплификации первого этапа. Для проведения ПЦР использовали компоненты производства ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора.

Программа амплификации первого раунда: 1 цикл (95 °C - 15 мин), 30 циклов (95 °C - 15 с, 58 °C - 30 с, 72 °C - 30 с). Программа амплификации второго раунда: 1 цикл (95 °C - 15 мин), 30 циклов (95 °C - 15 с, 60 °C - 25 с, 72 °C - 30 с). После подтверждения продукта амплификации с помощью гель-электрофореза все ампликоны были секвенированы по Сэнгеру. Полученные после секвенирования хроматограммы собирали по двум комплементарным цепям ДНК в программе SeqMan из пакета Lasergene 7.1 (DNAStar, CA, США). Далее проводили филогенетический анализ нуклеотидных последовательностей изолятов с применением программы MEGA версии 6.06.

С применением набора реагентов "АмплиСенс® Borrelia miyamotoi-FL" также была изучена частота встречаемости в Самарской области B. miyamotoi.

Результаты и обсуждение

В лечебно-профилактические учреждения Самарской области ежегодно обращаются за медицинской помощью пострадавшие от присасывания клещей, причем отмечается тенденция к росту их количества. Если в 2006 г. были зарегистрированы 2525 пострадавших, то в 2019 г. рост увеличился в 3 раза - 7728 случаев (рис. 1).

Несмотря на то что показатель инцидентности ИКБ в Самарской области значительно ниже среднероссийского (в 2022 г. - 0,44 на 100 тыс. населения), в последнее время отмечается устойчивая тенденция роста заболеваемости (рис. 2).

При анализе официальных данных за период 2015-2019 гг. заболеваемость ИКБ в Самарской области регистрируется с июня по ноябрь включительно, с преобладанием в летнее время, с пиками в июне и июле (18,52 и 25,93% соответственно). Второй подъем заболеваемости отмечается в осенний период, при этом пик приходится на октябрь (16,67% случаев от числа всех заболевших).

Следует отметить территориальную неравномерность показателей инцидентности ИКБ в Самарской области. Районы с отсутствием или низким уровнем заболеваемости, как правило, расположены в южной части области, в степных зонах, в которых встречаемость клещей рода Ixodes низкая. Средние и высокие показатели были отмечены в основном в северной и центральной частях региона, при этом у жителей города ИКБ регистрировали в 3 раза чаще, чем у сельского населения. Лидировал по числу заболевших городской округ Самара (43,78% случаев ИКБ), далее - город Тольятти (23,61%), Челно-Вершинский (7,3%), Сергиевский (3,26%) и Красноярский (3,0%) районы.

Количество районов области, где за разные периоды наблюдения выявлены случаи заболевания, составило 16 (61,54%). На рис. 3 приведено ранжирование районов области по среднемноголетнему показателю заболеваемости ИКБ (за период 2015-2019 гг.). За высокий уровень заболеваемости принимали значения инцидентности ИКБ выше 1,0 на 100 тыс. населения, средний уровень - от 0,4 до 1,0 на 100 тыс. населения, низкий уровень - менее 0,4 на 100 тыс. населения.

В 6 городах (60% общего числа городских округов в области) были зарегистрированы случаи ИКБ.

По данным ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в Самарской области", за 2015-2019 гг. в результате обращения граждан, подвергшихся наползанию клещей, были сняты и морфологически идентифицированы более 27 тыс. экземпляров клещей. На клещей рода Ixodes от общего количества всех учтенных приходилось 2863 (10,6%) особей, из них женских - 99,1%, мужских - 0,9%. Остальные клещи относились к роду Dermacentor.

Случаи присасывания клещей рода Ixodes чаще всего регистрировали при выездах на дачу (42,8%), в лес (24,6%), на кладбище (2,6%), в городские парки (1,5%); 27,7% обратившихся не смогли назвать место, где могло произойти наползание членистоногого. В городской черте областного центра наиболее часто присасывания клещей были отмечены при посещении парков Гагарина (26,53%), Загородный (14,29%) и 50 лет Октября (10,2%), а также кладбищ Рубежное (74,75%) и Южное (16,16%).

По данным скрининга методом ПЦР, боррелии были обнаружены только в клещах рода Ixodes (по морфологическим признакам отнесенных к виду Ixodes ricinus). Суммарная зараженность I. ricinus за наблюдаемый 5-летний период (2015-2019) составила 11,74% (336 особей). Присасывания клещей, в которых выявлено наличие боррелий, регистрировали в Красноярском - 24,2%, Похвистневском - 7,2%, Ставропольском - 2,7% районах Самарской области. Среди районов городского округа Самара лидировали Красноглинский (48,1% случаев), Октябрьский (22,2%), Куйбышевский (14,8%) районы.

Изученные клещи в 0,6% случаев содержали не только боррелии, но и вирус клещевого энцефалита. Наиболее часто таких клещей снимали в городском округе Самара, в особенности в Красноглинском (27,2% случаев) и Куйбышевском (18,1%) районах, реже - за пределами областного центра, в частности в Волжском (0,17%) и Безенчукском (0,07%). Вероятно, это объясняется тем, что пострадавшее от присасывания клещей не обращались за медицинской помощью, в том числе в доступные медицинские учреждения областного центра, на базе которых работают специализированные клинико-диагностические лаборатории.

Гомогенаты 39 особей клещей рода Ixodes, полученных от населения в 2021 г., в которых, по данным скринингового исследования, была выявлена ДНК B. burgdorferi sensu lato, были дополнительно исследованы с целью генотипирования боррелий. В образцах с достаточной для проведения секвенирования концентрацией ДНК типирован вид B. аfzelii. Филогенетический анализ показал, что большинство B. аfzelii, выделенных из клещей рода Ixodes в Самарской области, имели высокую идентичность нуклеотидной последовательности в пределах исследуемого локуса 5S-23S rRNA. Образцы ДНК 1566 и 1795 идентичны между собой на 100%, а с образцом 737 на 99%, отличаясь на один нуклеотид в положении 182. Изоляты ДНК 1566 и 1795 идентичны с HLJ-180 из Китайской Народной Республики на 97%, отличаясь на 9 нуклеотидов. Образец 737 по фрагменту 5S-23S rRNA идентичен на 99% с нуклеотидной последовательностью образца ДНК К78 из Австрии, отличаясь на 3 нуклеотида (см. таблицу, рис. 4).

В ходе пилотного изучения 100 особей клещей рода Ixodes, полученных от населения в 2019 г., ДНК В. miyamotoi была выявлена в 4 (4%) образцах. Этот вид боррелий, отнесенный к группе клещевых возвратных лихорадок, впервые был обнаружен на территории Самарской области в Борском, Кинельском, Шенталинском, Волжском районах. В 2021 г. при изучении 39 гомогенатов клещей в одном из них также была выявлена ДНК В. miyamotoi (2,56%).

Заключение

Для Самарской области, расположенной на юго-востоке европейской части РФ, характерно преобладание степных и лесостепных зон. Леса составляют около 13% всей территории, из них 84% лиственные. Это объясняет тот факт, что в регионе в структуре иксодофауны преобладают клещи рода Dermacentor. Однако, несмотря на это, клещи рода Ixodes как основные переносчики возбудителя ИКБ распространены в ландшафтах региона с преобладанием широколиственных деревьев (лесостепи) и в антропогенных очагах (лесополосы, в том числе в черте городов). Это согласуется с тем, что ИКБ в области чаще регистрировали в районах с относительно умеренным климатом и благоприятным для обитания клещей рода Ixodes ландшафтом. Ландшафтные и климатические особенности в отдельных центральных и северных районах области способствуют сохранению высоких рисков инфицирования человека на их территории боррелиями, патогенными для человека.

Заболеваемость ИКБ в основном зарегистрирована в круп-ных городах, а также в пригородных зонах, активно используемых населением в рекреационных целях. Наличие активных природных и антропургических очагов ИКБ в северных и центральных районах области подтверждается ежегодным обнаружением боррелий в иксодовых клещах и ростом количества обращений в лечебно-профилактические организации пострадавших по поводу присасывания клещей.

В ходе проведенного пилотного генотипирования боррелий было выявлено одномоментное инфицирование клещей как минимум двумя видами боррелий - В. miyamotoi и B. аfzelii. Это не исключает наличия и других патогенных для человека геновариантов борррелий, но требует дальнейшего изучения. Следует обратить внимание на то, что В. miyamotoi является одной из наиболее распространенных в Российской Федерации и вызывает сложно диагностируемую безэритемную форму боррелиоза. В связи с этим целесообразно всех пострадавших от присасывания клещей рода Ixodes, в особенности в районах с высоким и средним уровнем заболеваемости ИКБ, направлять к врачу-инфекционисту для длительного наблюдения (сроком не менее 3 мес) за состоянием их здоровья и проведения необходимых лабораторных исследований для верификации диагноза. Важно до антибиотикотерапии и в первые 2 нед после инфицирования, независимо от наличия или отсутствия эритемы, проводить исследование крови методом ПЦР на наличие не только ДНК B. burgdorferi s.l., но и В. miyamotoi. Изучение спектра антител разных классов более информативно, особенно на ранних стадиях заболевания [10]. Поэтому в более поздние сроки целесообразно наблюдение за динамикой специфических антител по классам иммуноглобулинов к антигенам боррелий методом иммуноферментного анализа и/или иммуноблоттинга.

ЛИТЕРАТУРА

1. О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2022 году: Государственный доклад. Москва : Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2023. С. 235-237.

2. Рудакова С.А., Теслова О.Е., Муталинова Н.Е., Пеньевская Н.А., Блох А.И., Рудаков Н.В. и др. Обзор эпидемиологической ситуации по иксодовым клещевым боррелиозам в 2013-2022 гг. и прогноз на 2023 г. // Проблемы особо опасных инфекций. 2023. № 2. С. 75-87. DOI: https://doi.org/10.21055/0370-1069-2023-2-75-87

3. Коренберг Э.И., Помелова В.Г., Осин Н.С. Природноочаговые инфекции, передающиеся иксодовыми клещами. Москва, 2013. 464 с.

4. Колясникова Н.М., Сарксян Д.С., Топоркова М.Г., Стуколова О.А., Карань Л.С., Платонов А.Е. Эпидемиологические и клинические аспекты безэритемных форм иксодовых клещевых боррелиозов в России // Журнал МедиАль. 2018. № 2 (22). С. 59-60.

5. Молочков В.А., Чеканова Т.А., Маркелов М.Л., Карань Л.С., Снарская Е.С., Ромашкина А.С. Выявление боррелиозной инфекции с помощью инновационной тест-системы в формате иммуночипа при склероатрофических поражениях кожи // Российский журнал кожных и венерических болезней. 2012. № 2. С. 32-35.

6. Молочков В.А., Снарская Е.С., Маркелов М.Л., Чеканова Т.А., Карань Л.С., Ромашкина А.С. Склероатрофические поражения кожи, ассоциированные с боррелиозной инфекций // Российский журнал кожных и венерических болезней. 2011. № 1. С. 45-49.

7. Чеканова Т.А., Манзенюк И.Н. Клещевые возвратные лихорадки и геновидовое разнообразие боррелий: текущее состояние вопроса // Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2021. Т. 20, № 6. С. 108-116.

8. Саркисян Д.С., Платонов А.Е., Карань Л.С., Малинин И.Е., Халитова Л.И., Шахов В.И. и др. Клинические особенности "нового" клещевого боррелиоза, вызываемого Borrelia miyamotoi // Терапевтический архив. 2012. Т. 84, № 11. С. 34-41.

9. О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Самарской области в 2022 году: Государственный доклад. Самара: Управление Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека по Самарской области. ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии в Самарской области", 2023. 195 с.

10. Чеканова Т.А., Маркелов М.Л., Карань Л.С., Ушакова М.А., Пудова Е.А., Ромашкина А.С. и др. Новые возможности серологической диагностики иксодовых клещевых боррелиозов с использованием иммуночипа // Клиническая лабораторная диагностика. 2013. № 12. С. 51-55.

Материалы данного сайта распространяются на условиях лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License («Атрибуция - Всемирная»)